高中生物DNA粗提取与鉴定同步作业.pdfVIP

专题5和蛋白质技术

第16的粗提取与鉴定

目标导航1.了解的性质。2.理解粗提取以及鉴定的原理。

一、提取的方法

1.提取生物大分子的基本思路

(1)选用一定的或方法分离具有不同或化学性质的生物大分子。

(2)的粗提取就是利用与、和等在或化学性

质方面的差异，提取，去除其他成分。

2.提取分子的基本原理

(1)利用的溶解性

①和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一点，选择

适当浓度的NaCl溶液就能使溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。

与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。

2mol/L0.14mol/L

溶解规律

NaClNaCl

在NaCl溶液中，浓度为mol/L时溶解度

溶解析出

部分发生

蛋白质NaCl浓度从2mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大溶解

盐析

由上表可以看出，在NaCl为2mol/L时，而部分蛋白质发生盐析而生成

，通过过滤可除去部分；NaCl为0.14mol/L时，过滤可除

去溶解的部分。

②不溶液，但是细胞中的某些蛋白质则。利用这一原理，可将

与蛋白质进一步分离。

(2)利用和蛋白质对酶、和的耐受性不同

①蛋白酶能水解蛋白质，但对没有影响。

②大多数蛋白质受的高温，而在80℃以上才会变性。

③洗涤剂能够溶解，但对没有影响。

(3)的鉴定：在沸水浴的条件下，遇会染成。

二、提取及鉴定的实验流程

1.实验材料的选取

实验材料的选择原则是选用含量高的生物组织。有些材料不宜选用，些哺

乳动物的成熟红细胞无细胞核，无法提取。实验中一般选用或作为

实验材料。

2.破碎细胞，获取含的滤液

(1)动物细胞一般采用破碎的方法。

(2)植物细胞需要先用溶解细胞膜，再加入一定量，进行充分