朊病毒疾病研究.pptxVIP

1又称“驴跑病”、“搔痒病”是成年绵羊偶尔发生于山羊的一种缓慢发展的传染性中枢神经系统疾病。特征——潜伏期长、剧痒、肌肉震颤、衰弱、萎顿、进行性运动失调最后瘫痪死亡。一、痒病(Scrapie)

2我国还未发现疯牛病和痒病，但曾在英国进口绵羊中检出痒病，也发现了人的克雅二氏病。由于朊病毒的特殊传播方式和发病率低等原因，人们大可不必恐慌。1990年我国农业部即禁止从英国及其它发生BSE的国家进口牛、牛精液、牛胚胎、牛肉及其肉骨粉。农业部将疯牛病列入一类病。也不应在动物饲料中使用任何哺乳动物肉骨粉。

3痒病的病原属于亚病毒因子中的朊病毒（Prion），有人译为朊粒或朊蛋白。朊病毒是一种特殊传染因子，它不同于一般病毒，也不同于类病毒，它没有核酸，而是一种特殊的糖蛋白。许多种正常动物和人的脑细胞及其他细胞也有这类朊蛋白。1、病原

4Prion：蛋白性感染颗粒（Proteinaceousinfectiousparticle）。这个成份中只含一种蛋白质，称为朊病毒蛋白（prionprotein,PrP），并命名为朊病毒（Virino）。这种蛋白质的基因，不但在染病动物脑中存在，亦在正常动物脑中找到，而且表达得一样多。

51972年，由于Prusiner的一位病人死于克雅氏病，促使他开始研究这类疾病。经过10年努力，Prusiner终于在1982年从仓鼠脑中浓缩了羊搔痒病病原成分。其浓缩成分的活性可被蛋白酶K，二乙酰焦碳酸、尿素、酚和SDS等失活，但不能被核酸酶E或紫外线照射破坏。所以Prusiner称之为Prion,意为蛋白性感染颗粒。

6PrP基因与朊病毒蛋白的合成PrP基因及其编码产物

7PrP有两类：一类是正常细胞具有的，易被蛋白酶消化降解，存在于细胞表面，无感染性，PrPc；当结构异常时，就成为另一类有致病性PrP，对蛋白酶K有一定抵抗力，用PrPsc代表。可以在体内聚集。两者在mRNA和氨基酸水平无任何差异，但生物学特性和立体结构不同。

8一级结构二级结构多肽链本身折叠或盘曲所形成的局部空间构象三级结构四级结构α－螺旋β－折叠

9二级结构出现?→?转换，PrPc?螺旋含量达到42%，?片层仅占3%；PrPsc?螺旋含量降到30%，?片层达到45%；?片层含量增加后聚合成淀粉样原纤维。变构异常蛋白会凝聚在一起，沉积在大脑中，引起神经细胞退行性病变。同时，异常PrP可以结合正常的PrPC蛋白，使之发生相同的结构改变，从而复制传染。这两种蛋白质具有相同的氨基酸顺序，由同一基因编码，但三维结构却差异很大，因此这种病原引起的疾病称为构象病。

10prion的两种形式，正常（左）和变异（右）

11确知Prion是一种既有蛋白质后(由神经细胞制造，而非入侵的病毒制造)，就可以从这种蛋白质倒推回制造它的RNA，然后从RNA回到DNA。1986年就解开了老鼠、仓鼠、人类制造普利子蛋白的DNA序列——基因——密码，而且发现它们基本一致，在分子的层次上证实了加德赛克的先见之明：所有传染性海绵质脑病变基本上是同一种疾病。这些DNA序列可作为探讨这种疾病的不同形式之间奇异的工具。

12PrPsc(致病性朊病毒)分子大小为27～30KD与正常机体细胞膜成分结合在一起，不易为机体免疫系统所识别（机体自身物质），不能激发机体产生抗体。

13PrPsc抵抗力很强，对热、辐射、酸碱和常规消毒剂有很强的抗性。病畜脑组织匀浆经134～138℃高温1h，对实验动物仍有感染力；用含有PrPsc的组织制成的饲料(肉骨粉)或用于人类食品或化妆品的添加剂，干热180℃1h仍有部分感染力。病畜组织在10%～20%福尔马林中几个月仍有感染力，还能耐受2mol/L的氢氧化钠达2h。

141997年诺贝尔医学或生理学奖Prusiner

15Prion概念的提出，引起轩然大波。许多人问：没有核酸，这个病原物如何增殖？如何复制本身的遗传信息。

许多人怀疑：可能还是存在核酸，只是未能检测出来。

16“诺贝尔奖的授予可能窒息不同观点的深入探讨。”

“诺奖委员会应等到确实证明仅仅是蛋白质本身在感染中起作用，没有其他因子参与，再授奖才合适。”

美国媒体报道标题：

“美国科学家因一项有争议的研究获诺贝尔医学奖”争论还在继续

17DNA→RNA→肽链→蛋白质挑战中心法则？DNA的自我复制RNA病毒逆转录病毒朊病毒？？？

18朊病毒的发现与思考1）蛋白质是否可以作为遗传物质？prion是生命的一个特例？还是仅仅为表达调控的一种形式？2）蛋白质折叠与功能的关系，是否存在折叠密码？(第二遗传密码）

19传播途径主要是食入被朊病毒污染的食物，如反刍动物肉