第十四章高效液相色谱法.pptVIP

第一页，共五十七页。;概述;高效液相色谱与经典液相色谱比较;气相色谱;高效液相色谱法的分类;根据固定相和液体流动相相对极性的差别，有正相色谱和反相色谱两种色谱体系或方法。

反相色谱和正相色谱主要区别是流动相和固定相的相对极性，（反相：流动相的极性大于固定相；正相：流动相的极性小于固定相）。最初形成于液液分配色谱，现已广泛应用于其他各种色谱方法。;高效液相色谱仪;现代高效液相色谱仪配备一或多个流动相储液器，一般为玻璃瓶，亦可为耐腐蚀的不锈钢、氟塑料或聚醚醚酮(PEEK)特种塑料制成的容器。每个储瓶容积500~2000mL。储液瓶位置要高于泵体，以保持一定的输液静压差，在泵启动时易于让残留在溶剂和泵体中微量气体通过放空阀排出。

储器常装有脱除溶剂中溶解的氧、氮等气体装置，这些溶解气可能形成气泡引起谱带展宽，并干扰检测器正常工作。溶剂脱气主要有两种方法，其一是搅拌下真空或超声波脱气；另一种是通入氦或氮等惰性气体带出溶解在溶剂中空气。储液器的溶剂导管入口处装有过滤器，以进一步除去溶剂中灰尘或微粒残渣，防止损坏泵、进样阀或堵塞色谱柱。;高压输液系统;高效液相色谱柱比气相色谱柱短得多（约5～30cm），所以柱外展宽（又称柱外效应）较突出。柱外展宽是指色谱柱外的因素所引起的峰展宽，主要包括进样系统、连接管道及检测器中存在死体积。柱外展宽可分柱前和柱后展宽。