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高三生物一轮复习基因工程
第34讲基因工程【考纲要求】1.基因工程的诞生(A)2.基因工程的原理及技术(B)3.基因工程的应用(B)4.蛋白质工程(A)5.转基因生物的安全性问题(A)6.生物武器对人类的威胁(A)
限制酶存在于原核生物中的作用是什么?思考原核生物容易受到外源DNA的入侵限制酶的作用:切割外源DNA,使之失效保证自身的安全限制酶为什么不剪切原核生物本身的DNA?思考防御机制1.同一原核细胞内有限制酶,但没切割序列2.有酶且有切割序列,但甲基化酶的作用下把甲基转移到碱基上,让限制酶不能切割
DNA连接酶和DNA聚合酶异同?相同点——作用位点都在磷酸二酯键思考不同点:DNA聚合酶:单个与片段之间(单个核苷酸与核苷酸片段)DNA连接酶:片段与片段之间(核苷酸片段与核苷酸片段)DNA连接酶DNA连接酶DNA聚合酶GA
(1)能在细胞内进行__________(2)有切割位点,便于目的基因插入(3)具有_____基因,供重组DNA筛选(4)对宿主细胞的生存无影响(5)载体大小适合自我复制一个或多个限制酶标记载体的必备条件:
⑥过程:a、DNA变性(90℃-95℃):双链DNA模板在热作用下,_____断裂,形成________b、退火(复性55℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部________。c、延伸(70℃-75℃):在Taq酶的作用下,合成与模板互补的________。氢键单链DNA双链DNA链d.重复a.b.c步骤:每重复一次,目的基因增加___倍一
DNA附着在膜上硝化纤维素加探针探针(含同位素分子)变性DNA分子杂交(如检测SARS病毒等)abcd
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