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实验动物检疫规程

一、普通级实验动物入场检疫规程

普通级实验动物入场检疫是保障实验动物质量、防止疫病传入动物设施的关键环节。该规程适用于新引进的普通级啮齿类、兔类等实验动物的入场前检疫工作，旨在通过系统的临床观察、病原检测和寄生虫检查，确保引入动物的健康状态符合基本要求。

检疫项目主要包括三个方面。临床观察涵盖动物的精神状态、被毛光泽度、眼鼻分泌物、呼吸频率、采食饮水量、粪便形态等外观指标。病原检测重点针对常见致病菌如沙门氏菌、志贺氏菌、泰泽病原体等，采用微生物培养法或PCR方法进行筛查。寄生虫检查包括体外寄生虫（螨、虱）和体内寄生虫（蛲虫、球虫）的镜检鉴定。

操作流程分为五个阶段。第一步，隔离观察。新引进动物应在独立隔离室观察7至10天，隔离室温度控制在20至26摄氏度，相对湿度维持在40%至70%，换气次数不少于每小时15次。每天上午和下午各进行一次临床观察，每次观察时间不少于15分钟，记录动物行为异常比例。第二步，样本采集。在隔离第3天和第7天分别采集样本，每组动物随机抽取不少于10%个体，采集新鲜粪便样本约5克，眼部和鼻腔拭子各2支，血液样本0.5毫升。第三步，实验室检测。粪便样本采用饱和盐水漂浮法检查寄生虫卵，培养法检测致病菌。拭子样本接种于选择性培养基，在37摄氏度培养24至48小时。血液样本进行血涂片镜检，观察血细胞形态。第四步，结果判定。若临床观察未发现异常行为动物比例超过5%，且实验室检测所有样本均为阴性，则判定为检疫合格。若发现异常动物比例在5%至10%之间，需延长隔离观察期3至5天。若异常比例超过10%或实验室检测发现病原体，判定为检疫不合格。第五步，后续处理。检疫合格动物方可转入饲养区，不合格动物群体应全部退回供应商或实施人道安乐死，隔离室进行彻底消毒，消毒后空置不少于7天方可再次使用。

判定标准依据国家标准GB14922.1和GB14922.2执行。细菌检测中，沙门氏菌和志贺氏菌不得检出，检出率必须为零。寄生虫检测中，体外寄生虫镜检200个视野不得发现虫体或虫卵，体内寄生虫卵检测每克粪便不得超过5个。临床观察指标中，动物体重应在同品种同周龄标准体重的正负15%范围内，日采食量不低于标准量的80%。

处理措施根据检疫结果分级实施。对于检疫合格动物，转入饲养区后仍需进行14天的适应性饲养，期间继续监测体重增长曲线，周体重增长率应达到5%至8%。对于检疫不合格但临床症状轻微的动物群体，可在隔离室进行治疗，使用广谱抗生素如恩诺沙星，剂量为每千克体重10毫克，每日一次，连续5至7天，治疗后重新采样检测。对于检出重大人兽共患病原体的动物，必须立即实施安乐死，尸体按医疗废物处理，运输过程使用双层密封袋，表面喷洒有效氯浓度为1000毫克每升的消毒液。

数据支撑方面，行业报告显示，严格执行入场检疫可使实验动物疫病发生率降低约60%至75%。临床研究表明，隔离观察7天能够发现约85%的潜伏期感染病例。官方统计数据显示，普通级实验动物入场检疫合格率约为85%至92%，主要不合格原因为寄生虫感染和条件性致病菌携带。实践中，某动物中心在引入120只普通级新西兰兔时，隔离期间发现3只兔出现腹泻症状，经检测确诊为球虫感染，及时隔离治疗避免了疫情扩散。

二、SPF级实验小鼠隔离检疫规程

SPF级实验小鼠隔离检疫是维持无特定病原体状态的核心保障措施。该规程适用于新引进的SPF级小鼠在专用隔离设施内进行的系统性检疫，确保其不携带特定的细菌、病毒和寄生虫，符合SPF级微生物学质量标准。

检疫项目涵盖微生物学和寄生虫学两大类别。细菌学检测包括必检项目：沙门氏菌、支原体、泰泽病原体、嗜肺巴斯德杆菌、支气管鲍特杆菌。病毒学检测包括小鼠肝炎病毒、小鼠细小病毒、仙台病毒、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒。寄生虫学检测包括体外寄生虫（疥螨、痒螨）和体内寄生虫（蛲虫、膜壳绦虫）的镜检和PCR检测。

操作流程分为六个关键步骤。第一步，隔离室准备。隔离室应为独立通风笼具系统，保持正压状态，压差维持在20至25帕，空气洁净度达到万级标准。室内温度控制在22至24摄氏度，相对湿度50%至60%，光照周期为12小时明12小时暗。隔离室使用前进行彻底消毒，采用过氧化氢蒸汽灭菌，浓度为35%，作用时间90分钟，消毒后空置24小时。第二步，动物接收。动物运输盒在隔离室传递窗内经紫外线照射30分钟，表面喷洒有效氯浓度为500毫克每升的消毒液。打开包装后，小鼠迅速转入预先消毒的隔离笼具，整个过程不超过5分钟，避免环境微生物污染。第三步，样本采集。在隔离第0天（到达当天）、第7天、第14天分别采样。每个隔离单元随机抽取3至5只小鼠，采集眼眶静脉血0.2毫升，气管拭子2支，新鲜粪便颗粒10粒，皮肤刮屑3处。血液样本用于病毒抗体检测，拭子用于细菌培养，粪便和皮屑用于寄生虫检查。第四步，