耐盐野生大豆DREB类转录因子基因的克隆与功能解析：探索植物抗逆分子机制.docxVIP

耐盐野生大豆DREB类转录因子基因的克隆与功能解析：探索植物抗逆分子机制

一、引言

1.1研究背景与意义

在植物的生长发育进程中，会面临各种各样的非生物胁迫，如干旱、高盐、低温等。这些非生物胁迫严重影响植物的正常生长、发育和繁殖，对全球农业生产造成了巨大的损失。据统计，全球约20%的灌溉土地受到盐渍化的影响，导致农作物减产甚至绝收。干旱胁迫更是每年都给农业生产带来不可估量的经济损失。在低温环境下，许多农作物的生长周期延长，品质下降。因此，提高植物的抗逆性，使其能够在恶劣的环境条件下正常生长，成为了农业领域亟待解决的关键问题。

转录因子在植物应对非生物胁迫的过程中发挥着至关重要的作用。转录因子又称反式作用因子，是一类能够与真核基因启动子区域中的顺式作用元件发生特异性相互作用，从而调控基因转录水平的蛋白质。它们可以通过激活或抑制下游一系列抗逆相关基因的表达，使植物产生一系列生理生化变化，进而增强植物对非生物胁迫的耐受性。例如，某些转录因子能够调节植物体内渗透调节物质的合成，如脯氨酸、甜菜碱等，这些物质可以调节细胞的渗透压，防止细胞在干旱或高盐环境下失水；一些转录因子还能调控抗氧化酶基因的表达，增强植物清除活性氧的能力，减轻氧化损伤。

野生大豆（Glycinesoja）作为栽培大豆（Glycinemax）的近缘野生种，具有丰富的遗传多样性和许多优良的性状，如耐盐、耐旱、抗病等。其中，耐盐野生大豆蕴含着大量与耐盐相关的基因资源，是研究植物耐盐机制和挖掘耐盐基因的宝贵材料。DREB（Dehydration-ResponsiveElementBinding）类转录因子是植物中一类重要的转录因子，能够特异性地结合DRE/CRT（Dehydration-ResponsiveElement/C-repeat）顺式作用元件，激活下游一系列与干旱、高盐、低温等非生物胁迫相关基因的表达，在植物抗逆反应中起着核心调控作用。

对耐盐野生大豆DREB类转录因子基因进行克隆与分析，具有重要的理论意义和实际应用价值。在理论方面，有助于深入揭示植物耐盐的分子机制，丰富对植物抗逆信号转导途径和基因调控网络的认识。通过研究DREB类转录因子基因在耐盐野生大豆中的结构、功能、表达模式以及与其他基因的相互作用关系，可以为理解植物如何感知和响应盐胁迫提供关键线索，填补植物耐盐分子生物学领域的一些空白。在实际应用方面，为农作物的抗逆遗传改良提供了重要的基因资源和理论依据。利用克隆得到的DREB类转录因子基因，通过基因工程技术将其导入到栽培大豆或其他农作物中，有望培育出具有高耐盐性的新品种，从而提高农作物在盐碱地等逆境条件下的产量和品质，有效缓解土地资源紧张和粮食安全问题，促进农业的可持续发展。

1.2国内外研究现状

1.2.1野生大豆耐盐性研究进展

野生大豆在长期的自然选择过程中，形成了对盐渍环境的适应机制，其耐盐性研究一直是国内外学者关注的热点。在耐盐生理方面，研究发现野生大豆通过多种生理调节机制来应对盐胁迫。例如，野生大豆能够通过茎叶表皮上的“腺体”将体内多余的盐分排出体外，从而降低盐分对细胞的伤害；对Na?和Cl?具有一定的排斥性，减少这些离子在体内的积累，维持离子平衡。野生大豆还具有较强的抗氧化能力，能够激活抗氧化酶系统，如超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）等，清除盐胁迫下产生的过量活性氧，减轻氧化损伤。大豆异黄酮代谢也与野生大豆的耐盐性密切相关，在盐胁迫下，大豆异黄酮的含量和合成相关酶的活性会发生变化，可能参与了植物的耐盐过程。

在耐盐遗传方面，随着分子生物学技术的不断发展，对野生大豆耐盐基因的挖掘和定位取得了一定进展。通过构建野生大豆与栽培大豆的杂交群体，利用分子标记技术，定位到了多个与耐盐性相关的数量性状位点（QTL）。香港中文大学、华大基因等单位联合完成的野生大豆W05的全基因组测序工作，通过对野生大豆重要农业性状关联基因研究，发现了新的耐盐基因GmCHX1，在盐胁迫条件下，该基因负责维持较低的钠离子与钾离子比率，以增强大豆的耐盐性。这些研究成果为进一步克隆和解析野生大豆耐盐基因的功能奠定了基础。

1.2.2DREB类转录因子研究现状

DREB类转录因子属于AP2/EREBP（APETALA2/ethylene-responsiveelementbindingprotein）转录因子家族，其结构中含有一个约60个氨基酸组成的保守AP2/EREBP结构域。根据氨基酸序列和功能的差异，DREB类转录因子又可细分为多个亚族。该类转录因子的作用机制主要是通过识别并结合靶基因启动子区域的DRE/CRT顺式作用元件（核心序列为CCGAC），招募RNA聚