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基因工程的基本内容中央电教馆资源中心高三生物基因工程的基本内容课件(*第1页,共27页,星期日,2025年,2月5日基因决定性状(二)豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮*第2页,共27页,星期日,2025年,2月5日基因决定性状(三)家蚕能够吐出蚕丝为人类利用*第3页,共27页,星期日,2025年,2月5日定向基因改造设想设想一能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮?能否让细菌“吐出”蚕丝?设想二能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物?设想三经过多年的努力,科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。*第4页,共27页,星期日,2025年,2月5日基因工程概念 基因工程:在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出所需要的基因产物。基因工程的别名基因拼接技术或DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达结果人类需要的基因产物*第5页,共27页,星期日,2025年,2月5日基因工程过程示意图①从细胞中分离出DNA①②③④⑤⑥②限制酶截取DNA片断③分离大肠杆菌中的质粒④DNA重组⑤用重组质粒转化大肠杆菌⑥培养大肠杆菌克隆大量基因*第6页,共27页,星期日,2025年,2月5日基因工程操作的工具将目的基因片断从人体细胞内提取,需要基因的剪刀——限制性内切酶。将目的基因与运载体DNA连接,需要基因的针线——DNA连接酶。将目的基因运入大肠杆菌,需要基因的运输工具——运载体。*第7页,共27页,星期日,2025年,2月5日限制性内切酶分布:主要在微生物中。特点:特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点。结果:产生黏性未端(碱基互补配对)。举例:大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切割点上将DNA分子切断。目前已发现的限制酶有200多种。*第8页,共27页,星期日,2025年,2月5日限制性内切酶作用过程点击播放*第9页,共27页,星期日,2025年,2月5日DNA连接酶连接酶的作用:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。连接的部位:磷酸二酯键,不是氢键。问题用DNA连接酶连接两个相同的黏性未端要连接几个磷酸二酯键?*第10页,共27页,星期日,2025年,2月5日DNA连接酶的作用过程点击播放*第11页,共27页,星期日,2025年,2月5日运载体作用:将外源基因送入受体细胞。条件:能在宿主细胞内复制并稳定地保存。具有多个限制酶切点。具有某些标记基因种类:质粒、噬菌体和动植物病毒。要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去。能将外源基因送入细胞的工具就是运载体。*第12页,共27页,星期日,2025年,2月5日质粒的特点细胞染色体外能自主复制的小型环状DNA分子;质粒是基因工程中最常用的运载体;最常用的质粒是大肠杆菌的质粒;存在于许多细菌及酵母菌等生物中;质粒的存在对宿主细胞无影响;质粒的复制只能在宿主细胞内完成。问题要想将某个特定基因与质粒相连,需要几种限制性内切酶和几种DNA连接酶处理?*第13页,共27页,星期日,2025年,2月5日基因操作的基本步骤提取目的基因目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达*第14页,共27页,星期日,2025年,2月5日提取目的基因将需要的基因从供体生物的细胞内提取出来。取出DNA用限制酶切断DNA目前被较广泛提取使用的目的基因有:苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。*第15页,共27页,星期日,2025年,2月5日提取目的基因的方法(一)直接分离基因——鸟枪法将供体生物的DNA用限制酶切割为许多片段,再用运载体将这些片段都运载到受体生物的不同细胞中去。只要有一个细胞获得了需要的目的基因并得以表达,基因工程就算成功了。该法最大的缺点是带有很大的盲目性,工作量大,成功率低。且不能将真核生物的基因转移到原核生物中去。用限制酶切成许多片断*第16页,共27页,星期日,2025年,2月5日提取目的基因的方法(二)人工基因合成法逆转录法:以信使RNA为模板,在逆转录酶的作用下将脱氧核苷酸合
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