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(新)产前筛查和产前诊断技术质量控制总结(2篇)

第一篇

产前筛查技术质量控制需贯穿检测全流程，涵盖样本采集、实验室检测、结果解读及临床沟通等环节，以确保筛查准确性和临床有效性。血清学筛查作为传统产前筛查技术，其质量控制首先聚焦检测前阶段。孕妇基础信息采集需精准，包括年龄（精确至天）、末次月经时间，结合超声孕周核对（早孕期CRL或中孕期双顶径测量，误差控制在±3天内），避免孕周误判导致风险值计算偏差。样本采集需使用一次性真空采血管（如促凝管），严格标注孕妇姓名、孕周、采样时间，采集后30分钟内于2-8℃条件下离心（3000rpm，10分钟），分离血清并避免溶血（血红蛋白浓度5g/L时，Freeβ-hCG检测值可升高15%-20%）、脂血（甘油三酯5.6mmol/L时，AFP检测值降低10%）及黄疸（胆红素171μmol/L时，PAPP-A活性受抑制）。样本保存需在2-8℃条件下≤48小时检测，若延迟检测需-20℃冷冻（避免反复冻融，≤3次），冷冻样本复溶后需充分混匀并离心（1500rpm，5分钟）。

检测中质量控制需强化仪器与试剂管理。检测仪器（如全自动化学发光免疫分析仪）需每日开机前进行自检（光路系统、温度模块、加样针精度验证），每周校准（使用配套校准品，涵盖分析测量范围，校准曲线r2≥0.999），每月维护（清洁反应杯轨道、更换光源灯）。试剂需在有效期内使用，2-8℃避光储存，启用前平衡至室温（30分钟），每批次试剂需进行性能验证：准确度（与靶值偏差≤10%）、精密度（批内CV≤5%，批间CV≤8%）、线性范围（如PAPP-A0.1-100mIU/L，r2≥0.995）、检出限（如Freeβ-hCG≤0.1ng/mL时CV≤20%）。室内质控需设置高、中、低三个浓度水平（如AFP质控品浓度分别为50、100、200IU/mL），每批次检测前测定，结果需在±2SD范围内（Westgard多规则质控，13s失控时立即复测，22s、R4s失控时查找系统误差）。某次室内质控中，低浓度Freeβ-hCG连续3次低于-2SD，追溯发现试剂冷藏温度波动至10℃（超出2-8℃范围），更换试剂并重新校准后，质控恢复正常。

室间质评与结果报告标准化是血清学筛查质量控制的关键。实验室需每季度参加国家卫生健康委临检中心室间质评，回报结果中各标志物检测偏差需≤15%，对于偏差项目（如某次PAPP-A检测值较靶值低20%），需启动根因分析：核查校准品批号（发现与试剂批号不匹配）、仪器加样体积（校准后恢复正常）、操作人员培训记录（补充专项操作考核）。风险值计算需采用权威软件（如LifeCycle、RiskCalc），纳入孕妇年龄、孕周、体重（体重80kg时需校正AFP、Freeβ-hCG浓度）、糖尿病史（妊娠期糖尿病可使AFP降低10%-15%）等因素，高风险切割值遵循最新指南（如早孕期联合筛查21-三体风险≥1/270，18-三体≥1/350）。报告内容需包含各标志物浓度、MoM值（中位数倍数）、风险值、参考范围、检测局限性（如无法检出所有染色体异常）及临床建议（高风险者建议产前诊断，低风险者告知仍有漏检可能），报告需双人核对（检测者与审核者签字），并提供咨询联系方式。

无创DNA产前检测（NIPT）作为高灵敏度筛查技术，质量控制需聚焦游离DNA（cfDNA）提取与测序流程。样本采集使用Streck管（含细胞稳定剂），避免使用肝素管（抑制PCR反应），采集后2-8℃保存≤72小时，运输过程温度监控（记录冷链数据，避免-20℃冷冻）。cfDNA提取采用磁珠法，提取后通过Qubit4.0定量（浓度≥3ng/μL），Agilent2100Bioanalyzer检测片段分布（主峰166bp±10bp，避免降解峰），A260/A280比值1.8-2.0。文库构建需验证超声打断效率（DNA片段150-200bp占比≥80%），使用UMI（唯一分子标识符）标记减少PCR重复偏差，文库浓度通过qPCR定量（20-200pM），片段大小分布符合要求（主峰250-350bp）。测序平台（如IlluminaNovaSeq）需每日进行Flowcell质控（簇密度≥1000K/mm2，簇通过率≥90%），测序深度≥10Mreads，基因组覆盖度≥95%，Q30≥85%，接头污染率≤0.1%。

生物信息学分析是NIPT质量控制的核心环节。原始数据经过滤（去除低质量reads、接头序列）后，使用BWA-MEM比对至hg19参考基因组，比对率≥98%，重复序列去除后保留uniquereads。胎儿游离DNA浓度（FF）通过chrY序列占比（胎儿为男性）或染色体剂量分析法计算，FF4%时判定为检测失败（需重新采样），FF4%-8%时增加测序深度至1