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辣椒高赖氨酸基因（CFLR）导入小麦的分子育种及效应研究

一、引言

1.1研究背景与意义

1.1.1小麦遗传改良的重要性

小麦（TriticumaestivumL.）作为世界三大谷物之一，是全球范围内最重要的粮食作物之一，几乎全部作为主食，仅有少部分作为饲料。在中国，小麦的种植面积和产量仅次于水稻，是保障国家粮食安全的关键作物。其种植范围广泛，涵盖了从东北平原到华北平原，从黄土高原到长江流域等多个地区，为数十亿人口提供了主要的食物来源。

随着全球人口的不断增长以及人们生活水平的逐步提高，对小麦的产量和品质都提出了更高的要求。在产量方面，需要不断提高单产以满足日益增长的粮食需求；在品质方面，消费者对于小麦制品的口感、营养等方面的关注度日益增加。例如，在食品加工行业，制作面包需要高筋小麦，以保证面包的韧性和松软度；制作糕点则需要低筋小麦，使糕点更加酥脆。同时，小麦的营养品质也备受关注，蛋白质、维生素、矿物质等营养成分的含量直接影响着人体的健康。

传统的小麦遗传改良方法，如系统选育、杂交育种和诱变育种等，在一定程度上推动了小麦品种的改良和产量的提高。然而，这些方法存在周期长、效率低、难以打破物种间遗传限制等局限性。随着现代生物技术的快速发展，基因工程技术为小麦的遗传改良提供了新的途径和方法，能够实现基因的定向转移和精准修饰，从而更加高效地改良小麦的农艺性状和品质特性。

1.1.2赖氨酸对小麦品质的关键作用

小麦的营养品质主要取决于其蛋白质含量和氨基酸组成的平衡程度，其中必需氨基酸含量是决定小麦营养品质的关键因素之一。赖氨酸作为人体和动物必需的氨基酸，在小麦蛋白质中含量相对较低，是小麦的限制性氨基酸。小麦蛋白质中赖氨酸的匮乏，导致其氨基酸组成不平衡，极大地降低了小麦的营养价值。

国家“七五”计划期间对20184份小麦种质的蛋白质和赖氨酸含量测定结果显示，籽粒赖氨酸含量平均为0.438％±0.049％，变异系数11.13％，变幅0.250％-0.800％，高于0.500％的样品仅有2073份。这表明大部分小麦品种的赖氨酸含量处于较低水平。在实际应用中，小麦作为人类主食和动物饲料的重要原料，其赖氨酸含量不足会影响人体对蛋白质的吸收利用，也会降低动物的生长性能和饲料转化率。例如，在动物养殖中，饲料中赖氨酸缺乏会导致动物生长缓慢、体重增加不明显、免疫力下降等问题，增加养殖成本。因此，提高小麦中的赖氨酸含量，对于改善小麦的营养品质、满足人们对高品质小麦的需求具有重要意义。

1.1.3辣椒高赖氨酸基因（CFLR）的独特优势

辣椒（Capsicumannuum）是一种具有独特辣味和丰富营养素的蔬菜作物。一些前期研究表明，辣椒果实具有高含量的赖氨酸，这与辣椒的抗逆性和耐盐性有关。CFLR（Capsicumfrutescenslysine-richprotein）基因是从辣椒中发现的高含量赖氨酸基因，其编码的蛋白具有较高的赖氨酸含量。研究发现，Cflr基因总氨基酸数223个，赖氨酸数40个，赖氨酸含量为21.2%(w/w)，这一含量显著高于小麦等禾谷类作物中赖氨酸的含量。

将CFLR基因导入小麦，不仅有望提高小麦的赖氨酸含量，改善其营养品质，还可能赋予小麦一些与辣椒相关的抗逆特性。辣椒在长期的生长过程中，进化出了一系列适应逆境的机制，其基因可能携带了相关的抗逆信息。CFLR基因可能与辣椒的抗逆性相关，将其导入小麦后，有可能激活小麦自身的抗逆信号通路，或者直接参与小麦的抗逆生理过程，从而提高小麦对干旱、盐碱、低温等逆境条件的适应能力，为培育高产、优质、抗逆的小麦新品种提供新的基因资源和技术手段。

1.2国内外研究现状

在小麦遗传转化方面，自20世纪80年代末期小麦遗传转化研究开始，经过多年的发展，取得了一定的成果。目前小麦遗传转化的方法主要有基因枪法、农杆菌介导法和花粉管通道法等。基因枪法是借助高速运动的金属微粒使附着于其表面的核酸分子穿过受体的细胞壁，释放出的DNA分子随机整合到植物基因组中，该方法受体来源广泛、很少受基因型的限制、方法相对简单，截止到2001年，在获得小麦转基因植株的报道中，基因枪法占90%左右。农杆菌介导法是利用农杆菌将其Ti质粒上一段DNA（T-DNA）插入寄主植物细胞染色体中的能力，将目的基因导入植物细胞，虽然小麦不是农杆菌的天然宿主，但随着技术的不断改进，如日本烟草公司研发的农杆菌高效转化小麦幼胚的PureWheat技术，显著提高了小麦的转化效率，模式基因型Fielder的转化效率高达50-90%，并在此基础上建立了多个商业化小麦品种的遗传转化体系。花粉管通道法也有一些应用报道，但相对前两种方法应用较少。