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水黄皮PpCML38与PpSOS3基因克隆及其耐盐功能的探索性研究

一、引言

1.1研究背景与意义

土壤盐碱化是一个全球性的生态问题，严重威胁着农业生产和生态平衡。据联合国教科文组织和粮农组织不完全统计，全球盐碱地面积约为9.5438亿公顷，广泛分布于世界各个地区，从寒带、温带到热带，从美洲、欧洲、亚洲到澳洲，都有大量含盐、干燥、板结、荒芜的盐碱地。在中国，盐碱地分布广泛，涵盖西北、东北、华北及滨海地区等17个省区，盐碱荒地和影响耕地的盐碱地总面积超过5亿亩，其中具有农业发展潜力的面积占中国耕地总面积10%以上。盐碱地的高盐分环境会导致植物生长发育受到限制，影响农作物的产量和质量，甚至造成植物无法生存，这对农业生产和生态环境带来了巨大挑战。

在当前耕地资源日益紧张的情况下，提高植物的耐盐性，开发利用盐碱地，对于保障全球粮食安全和生态可持续发展具有至关重要的意义。传统的育种方法在提高植物耐盐性方面存在一定的局限性，而基因工程技术的发展为改良植物耐盐性提供了新的途径。通过研究耐盐植物的基因，挖掘其中的耐盐基因资源，并利用基因工程技术将这些基因导入到农作物中，有望培育出耐盐性更强的新品种，从而有效利用盐碱地资源，提高农作物的产量和质量。

水黄皮（Pongamiapinnata(Linn.)Pierre）作为一种耐盐植物，能够在海边潮汐能到达的地方正常生长，具有独特的耐盐机制。深入研究水黄皮的耐盐基因，不仅有助于揭示植物耐盐的分子机制，丰富植物耐盐理论，还能为农作物耐盐基因工程育种提供重要的基因资源和理论依据，对于推动盐碱地的开发利用，改善生态环境，保障农业可持续发展具有重要的现实意义。

1.2水黄皮概述

水黄皮是豆科水黄皮属的乔木，植株高度一般在8-15米。嫩枝通常无毛，有时稍被微柔毛，老枝则密生灰白色小皮孔。其羽状复叶长20-25厘米，小叶2-3对，呈现近革质，形状从卵形、阔椭圆形至长椭圆形不等，长度在5-10厘米，宽度为4-8厘米，先端短渐尖或圆形，基部宽楔形、圆形或近截形，小叶柄长6-8毫米。总状花序腋生，长度为15-20厘米，通常2朵花簇生于花序总轴的节上；花梗长5-8毫米，在花萼下有卵形的小苞片2枚；花萼长约3毫米，萼齿不明显，外面略被锈色短柔毛，边缘尤密；花冠白色或粉红色，长12-14毫米，各瓣均具柄，旗瓣背面被丝毛，边缘内卷，龙骨瓣略弯曲。荚果长4-5厘米，宽1.5-2.5厘米，表面有不甚明显的小疣凸，顶端有微弯曲的短喙，不开裂，沿缝线处无隆起的边或翅，有种子1粒，种子肾形。花期在5-6月，果期为8-10月。

水黄皮分布较为广泛，在国外，印度、斯里兰卡、马来西亚、澳大利亚、波利尼西亚等地都有它的踪迹；在国内，主要分布于福建、广东（东南部沿海地区）和海南。它喜光、喜水湿，耐轻盐土，多生于溪边、塘边及海边潮汐能到达的地方，属于中性植物，对光照要求不高，比较耐阴；生育适温在22-33℃，具有耐热特性；对土壤要求不严，可在瘠薄的立地条件下生长，其根部的根瘤菌具固氮作用，能改良土壤，提高土壤肥力；在水分需求上具有耐旱性；水黄皮幼苗在盐度为5-8克/千克处理下生长较好，盐度超过8克/千克后，生长不适，这表明它对土壤盐度具有一定的耐受性，可在盐度适合的沿海岸边生长。

水黄皮具有多方面的价值。在经济价值上，其木材纹理致密美丽，可用于制作各种器具；种子油可作燃料，具有潜在的生物能源开发价值。在药用价值方面，全株入药，可作催吐剂和杀虫剂。在生态价值上，沿海地区可将其作为堤岸护林和行道树，起到防风固沙、保护堤岸、改善生态环境的作用。鉴于水黄皮独特的耐盐特性和重要的应用价值，对其耐盐机制的研究，特别是耐盐基因的挖掘和功能分析，具有重要的科学意义和应用前景。

1.3PpCML38和PpSOS3基因相关研究进展

在植物耐盐机制的研究中，PpCML38和PpSOS3基因逐渐成为关注的焦点。CML（Calmodulin-likeproteins）家族成员在植物响应多种逆境胁迫中发挥着关键作用。已有研究表明，CML基因能够参与植物对盐胁迫的响应过程，通过与下游靶蛋白相互作用，调节植物细胞内的钙离子信号转导途径，进而影响植物的生理生化反应，增强植物的耐盐性。例如，在拟南芥中，某些CML基因的过表达能够提高植株在盐胁迫下的种子萌发率和幼苗存活率，增强植株对盐胁迫的耐受性。其作用机制可能是通过调控离子转运蛋白的活性，维持细胞内的离子平衡，减少钠离子对细胞的毒害作用。

SOS（SaltOverlySensitive）信号通路是植物应对盐胁迫的重要机制之