动物双歧杆菌乳亚种i797菌株特异性量化分析方法研究.pdfVIP

中国乳品工业

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动物双歧杆菌乳亚种i797菌株特异性量化分析方法研究

赵磊1,张栋?,刘洋

（1.上海市质量监督检验技术研究院国家市场监管重点实验室（乳及乳制品检测与监控技术），上海200233;2.君乐

宝乳业集团股份有限公司，石家庄050221）

摘要：动物双歧杆菌乳亚种i797(Bifidobacteriumanimalissubsp.lactisi797)是一株具有改善小儿腹泻和消化不良功能的潜在益生菌。通过

与其它22株动物双歧杆菌乳亚种菌株进行全基因组测序-单核苷酸多态性（WholeGenomeSequencing-SingleNucleotidePolymor-

phism，WGS-SNP)分析，确定了i797菌株位于K1717_01615基因上的一个特异性位点。根据该位点设计引物及探针，基于荧光定量

PCR建立了i797菌株的量化分析方法。结果表明，所选位点可以有效区分i797与其它18株双歧杆菌，且在传代40次过程中表现出较

强的稳定性。该检测方法对于i797菌株DNA浓度和菌液浓度的灵敏度分别为1.5pg和10+CFU/mL,重复性和重现性检测结果的相对

标准偏差分别小于2%和6%，并且对于高浓度同亚种菌株ATCC27673的抗干扰能力较强。利用该方法可以实现复合益生菌产品中i797

菌株的准确量化分析，为益生菌产品的质量控制和合规性评估提供了有效的解决方案。

关键词：动物双歧杆菌乳亚种；全基因组测序-单核苷酸多态性；株水平检测；定量PCR

中图分类号：TS207.4文献标识码：A

doi:10.19827/j.issn1001-2230.2024.05.009

Real-timePCRassaysforthestrain-specificdetectionofBifidobacteriumanimalis

subsp.lactisi797

1%

ZHAOLeil,ZHANGDong,LIUYang

(1.KeyLaboratoryofMilkandDairyProductsDetectionandMonitoringTechnologyforStateMarketRegulation,

ShanghaiInstituteofQualityInspectionandTechnicalResearch,Shanghai200233,China;2.JunlebaoDairyGroupCo.

Ltd.,Shijiazhuang050221,China)

Abstract:Bifidobacteriumanimalissubsp.lactisi797,aprobioticstrainwithpotentialtherapeuticapplicationsinpaediatricdiarrhoeaanddyspepsia,

wassubjectedtoacomprehensiveWholeGenomeSequencing-SingleNucleotidePolymorphism(WGS-SNP)analysisamongasetof23strains.

ThisanalysisidentifiedauniquegenomiclocusontheK1717_01615genethatisexclusivetostraini797.Utilizingthislocus,wedeveloped

primersandprobesforafluorescencequantitativePCR-basedquantitativeanalysismethod.Themethodwascapableofdistinguishingstraini797

from18otherBifidobacteriumstrains,andd