【课件】动物细胞培养课件高二下学期生物人教版(2019)选择性必修3.pptxVIP

第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养

导学

聚焦

1.生命观念——运用结构与功能观分析并归纳概括动物细胞培养的条件。

2.科学思维——基于事实和证据，采用归纳与概括等方法，以文字、模型构建的形式表示动物细胞培养过程。

3.社会责任——通过对干细胞特性的理解，认可能用干细胞

解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥反应的生活实际问题。

动物细胞培养(基础)

动物细胞融合

动物细胞核移植

动物细胞工程

一、动物细胞培养概述

1.概念

从动物体中取出_相关的_组织，将它分散成单个细胞,然

后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技

术；

2.原理：细胞增殖(有丝分裂)

3.地位：动物细胞工程的基础

4.过程中的关键操作：原代培养和传代培养

5.结果：获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体

无菌、无毒的环境

36.5±0.5℃7.2-7.4

适宜的温度、pH和渗透压

95%空气和5%CO₂

适宜的气体环境

营养条件

其他条件

糖类、鑫酸、无机盐、

维生素等

动物细胞培养的条件

二、动物细胞培养的条件

+血清

1.营养

(1)培养基构成：合成培养基+血清等一些天然成分

合成培养基：将细胞所需的营养物质(糖类、氨基酸、无机盐、

维生素等)按种类和所需量严格配制的培养基。

血清等一些天然成分：含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质

(2)培养基的物理性质

培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液

2.无菌、无毒的环境

(1)保证无菌、无毒环境的具体措施

①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；

②在无菌环境下进行操作；

③还需要定期更换培养液

(2)思考题

①为什么培养液需要定期更换?

以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害

②如何防止培养过程中的微生物污染?

在细胞培养液中添加一定量的抗生素

3.温度、pH和渗透压

(1)适宜的温度

哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5℃为宜；

(2)适宜的pH

多数动物细胞生存的适宜pH为7.2-7.4

(3)适宜的渗透压

维持适宜渗透压的目的维持细胞正常的形态和功能

4.气体环境

(1)组成

动物细胞培养所需气体主要有O₂和CO₂

(2)不同气体的作用

①0₂0,是细胞代谢所必需的

②CO₂:CO₂的主要作用是维持培养液的pH

(3)培养容器

通常采用培养皿或松盖培养瓶

(4)培养仪器

含有95%空气和5%CO₂的混合气体的CO₂培养

箱

三、动物细胞培养的过程

取动物组织

取动物组织

转入培养液中进行

原代培养

制成细胞悬液

传代培养

放入CO₂

培养箱中培养

放入CO₂

培养箱中培养

制成细胞悬液

转入培养液

原代培养

分瓶

传代培养

1.取动物组织

(1)取材：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。

(2)取材原因：细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养

2.制成细胞悬液

(1)将组织分散成单个细胞

①方法：机械法

用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间

②原因：

I.从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生

长和增殖；

Ⅱ.能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。

(2)用培养液将细胞制成细胞悬液。

思考：

1.用胰蛋白酶分散细胞，可以说明什么问题?

提示：动物细胞间的物质主要是蛋白质。

2.可以用胃蛋白酶处理吗?为什么?

提示：不可以；

胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性，

多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性，

所以用胃蛋白酶不行。

3.酶解法较温和，一定不会对动物细胞造成损伤，对吗?

提示：不对；

使用胰蛋白酶时，要控制好作用时间，因为胰蛋白酶不仅能分解细胞

间的蛋白质，长时间作用还会分解细胞膜蛋白等，对细胞造成损伤。

3.原代培养通常将分瓶之前的细胞培养，即动物组织处理后的初次培养

(1)具体做法

将细胞悬液放入_培养皿或培养瓶内

(2)体外培养的细胞有两大类

①能够悬液在培养液中生长增殖；

②大多数需要贴附于某些基质表面才能生长增殖(细胞贴壁);

体外培养的细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，这类细胞

往往贴附在培养瓶的瓶壁上。

(3)两类细胞的特点

①悬浮生长类

会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等

因素而分裂受阻

②贴壁生长类

除受密度、有害代谢物、营养物质影响外，还会发生