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水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法

氨氮是水体中氮循环的重要形态之一，其含量高低直接反映了水质的污染状况和自净能力。在各类水体监测中，氨氮都是一项核心的评价指标。当水体中氨氮含量超标时，不仅会导致水体富营养化，引发藻类疯长，破坏水生态平衡，还可能对水生生物产生直接毒性，甚至通过饮用水途径威胁人体健康。因此，准确、高效地测定水中氨氮含量，对于环境保护、水质管理以及保障公众健康都具有不可忽视的现实意义。

纳氏试剂分光光度法因其操作简便、灵敏度高、稳定性好等特点，长期以来在水质氨氮测定领域占据着重要地位。该方法基于经典的化学反应原理，通过观测特定波长下溶液的吸光度变化来实现对氨氮浓度的定量分析，其准确性和可靠性已在实践中得到广泛验证。

一、方法原理

纳氏试剂分光光度法测定氨氮的核心原理，是利用氨氮（以游离氨或铵离子形式存在）在碱性条件下与纳氏试剂（主要成分为碘化汞和碘化钾的强碱溶液）发生化学反应，生成一种黄棕色的络合物。该络合物的颜色深浅与水样中氨氮的浓度在一定范围内呈现良好的线性关系。在分光光度计上，于特定波长（通常选用420nm）处测定其吸光度，通过与已知浓度的标准溶液所绘制的标准曲线进行比对，即可计算出水样中氨氮的具体含量。

化学反应式可简单表示为：

2K?[HgI?]+3KOH+NH?→NH?Hg?IO↓(黄棕色)+7KI+2H?O

（实际反应更为复杂，此式仅为简化示意）

二、主要仪器与试剂

（一）主要仪器

1.分光光度计：应具备在420nm波长处测定吸光度的功能，配备10mm或更长光程的比色皿。

2.比色管：50mL，成套，具塞。

3.移液管：各种规格，如1mL、2mL、5mL、10mL等，确保准确移取液体。

4.容量瓶：50mL、100mL、500mL、1000mL，用于配制标准溶液和稀释样品。

5.烧杯、玻璃棒、洗瓶等常规实验室玻璃器皿。

6.天平和称量纸：用于试剂的准确称量。

7.pH计：用于调节溶液酸碱度（必要时）。

（二）主要试剂

实验用水均为无氨水或同等纯度的去离子水。所用化学试剂除非另有说明，均应为分析纯或以上级别。

1.纳氏试剂：

纳氏试剂的配制方法有多种，常用碘化汞-碘化钾-氢氧化钠（HgI?-KI-NaOH）法。

*称取一定量碘化钾（KI）溶于少量水中，在搅拌下，将一定量碘化汞（HgI?）粉末分多次加入碘化钾溶液中，直至有少量朱红色沉淀不再溶解为止。

*另称取一定量氢氧化钠（NaOH）溶于水，冷却至室温。

*将上述碘化钾-碘化汞溶液在搅拌下缓慢注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至一定体积，混匀。

*此试剂需静置过夜，取上清液贮于棕色试剂瓶中，密塞保存于暗处。

*注意：碘化汞有剧毒，操作时务必小心，避免接触皮肤和吸入粉尘，实验废液需妥善处理。

2.酒石酸钾钠溶液（500g/L）：

称取酒石酸钾钠（KNaC?H?O?·4H?O）溶于水中，加热煮沸以去除氨，冷却后稀释至一定体积，贮于试剂瓶中。

3.铵标准贮备溶液（ρN=1000μg/mL）：

称取在100℃~105℃干燥至恒重的优级纯氯化铵（NH?Cl），溶于水中，移入1000mL容量瓶中，稀释至标线，摇匀。此溶液可加入数滴三氯甲烷以抑制微生物生长，在2℃~8℃冷藏可稳定数月。

4.铵标准使用溶液（ρN=10μg/mL或ρN=2μg/mL）：

临用时，吸取一定体积的铵标准贮备溶液，用无氨水稀释至所需浓度。例如，吸取铵标准贮备溶液5.00mL于500mL容量瓶中，用无氨水稀释至标线，摇匀，此为10μg/mL的铵标准使用液。

5.其他辅助试剂：

如硫酸锌溶液（100g/L）、氢氧化钠溶液（250g/L）等，用于水样的预处理（絮凝沉淀法）；或硼酸吸收液等，用于蒸馏法预处理。

三、样品的采集与保存

水样的采集应按照相关的水质采样标准进行，使用清洁的塑料瓶或玻璃瓶。采集后应尽快分析，若不能及时分析，需采取冷藏（2℃~8℃）并加入硫酸酸化至pH2的措施（通常每升水样加0.5mL浓硫酸），这样可抑制微生物活动，使样品在采集后24小时内氨氮浓度变化较小。但需注意，酸化样品在测定前需用碱液中和。

四、实验步骤

（一）水样预处理

对于清洁水样，可直接进行测定。对于含有悬浮物、余氯、钙镁等金属离子、硫化物、有机物等干扰物质的水样，需进行预处理。

1.絮凝沉淀法：当水样浑浊或有颜色时，可加入适量硫酸锌溶液和氢氧化钠溶液，使生成氢氧化锌絮状沉淀，过滤去除。

2.蒸馏法：对于污染严重或干扰物质较多的水样，蒸馏法是更有效的预处理手段。将水样调至弱碱性，加热蒸馏，用硼酸溶液吸收馏出液，收集馏出液进行测定。

（二）标准曲线的绘制

1.取6~8支50mL比色管，分别加入铵标准使用