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天津pcr考试题及答案

一、填空题

1.PCR技术的全称是

2.PCR反应体系中，除了模板DNA、引物、dNTP外，还需要

3.PCR反应的三个基本步骤是

4.用于PCR的DNA聚合酶通常具有

5.引物设计的基本原则包括

6.PCR扩增时，延伸温度一般为

7.常见的PCR缓冲液中含有

8.影响PCR反应的因素有

9.PCR技术可用于

10.逆转录PCR的模板是

二、单项选择题

1.PCR技术的发明人是（）

A.穆利斯B.桑格C.吉尔伯特D.沃森

2.PCR反应中，引物的作用是（）

A.提供模板B.催化反应C.引导DNA合成D.提供能量

3.以下哪种DNA聚合酶常用于PCR（）

A.Taq酶B.DNA连接酶C.碱性磷酸酶D.末端转移酶

4.PCR反应中，变性的温度一般是（）

A.55℃B.72℃C.95℃D.100℃

5.引物的长度一般为（）

A.5-10bpB.10-15bpC.15-30bpD.30-50bp

6.进行PCR反应时，模板DNA的量一般为（）

A.1pg-1μgB.1mg-1gC.1ng-1μgD.1μg-1mg

7.PCR技术可用于扩增（）

A.RNAB.蛋白质C.DNAD.多糖

8.以下哪项不是PCR反应体系的成分（）

A.乙醇B.引物C.dNTPD.Taq酶

9.PCR反应中，退火温度与引物的（）有关

A.长度B.浓度C.序列D.以上都是

10.实时荧光定量PCR主要用于（）

A.基因测序B.基因表达定量分析C.蛋白质定量D.细胞计数

三、多项选择题

1.PCR技术的特点包括（）

A.特异性强B.灵敏度高C.操作简便D.快速高效

2.PCR反应体系中需要的成分有（）

A.模板DNAB.引物C.dNTPD.Taq酶E.缓冲液

3.影响PCR反应特异性的因素有（）

A.引物设计B.退火温度C.Taq酶质量D.dNTP浓度

4.PCR技术可应用于（）

A.基因克隆B.遗传病诊断C.病原体检测D.法医鉴定

5.以下哪些是PCR反应中的常见问题（）

A.扩增失败B.非特异性扩增C.假阳性结果D.PCR产物污染

6.实时荧光定量PCR的方法有（）

A.SYBRGreen法B.TaqMan探针法C.分子信标法D.双链DNA嵌入法

7.PCR技术中，引物设计的注意事项包括（）

A.避免引物内部形成二级结构B.引物之间不能有互补序列C.引物与模板的结合要特异D.引物长度合适

8.用于PCR的DNA模板可以是（）

A.基因组DNAB.cDNAC.质粒DNAD.线粒体DNA

9.PCR反应中，dNTP的浓度过高可能导致（）

A.非特异性扩增B.引物二聚体形成C.酶活性抑制D.扩增效率降低

10.以下哪些是PCR仪的主要性能指标（）

A.温度准确性B.温度均匀性C.升降温速度D.荧光检测灵敏度

四、判断题

1.PCR技术只能扩增DNA，不能扩增RNA。（）

2.引物的GC含量越高，退火温度越低。（）

3.PCR反应体系中，dNTP的浓度越高越好。（）

4.实时荧光定量PCR可以实时监测PCR反应的进程。（）

5.PCR技术可以用于扩增任何长度的DNA片段。（）

6.引物的长度越长，特异性越强。（）

7.PCR反应中，模板DNA的量越多，扩增效果越好。（）

8.Taq酶具有5-3外切酶活性。（）

9.逆转录PCR可以将RNA逆转录为cDNA后进行扩增。（）

10.PCR产物可以直接用于测序，无需进一步处理。（）

五、简答题

1.简述PCR反应的基本原理。

以DNA变性、退火及延伸为基础，通过高温使模板DNA变性解链，降温后引物与模板结合，在DNA聚合酶作用下，以dNTP为原料沿模板延伸合成新DNA链，经多次循环实现特定DNA片段扩增。

2.引物设计的要点有哪些？

避免引物内部及之间形成二级结构，引物与模板