非酒精性脂肪肝及肝纤维化的免疫浸润分析与中药靶点预测.pdfVIP

世界科学技术-中医药现代化★中药学研究

非酒精性脂肪肝及肝纤维化的免疫浸润分析与

中药靶点预测＊

121111＊＊

李璐吉，刘晓，王一，缪伟峰，杨勤，唐莉

（1.南京中医药大学附属南京中医院南京210022；2.重庆市中医院重庆400011）

摘要：目的本研究通过探讨巨噬细胞标志物与NAFLD及肝纤维化的相关性，以期为进一步探求

NAFLD肝纤维化的发病机制，探索有效中药成分，为中医药防治肝纤维化提供帮助和借鉴。方法基于生

物信息学方法分析NAFLD基因芯片，筛选差异表达基因；通过WGCNA共表达网络分析和构建LASSO模型，

筛选核心表达基因；利用CIBERSORT进行免疫细胞浸润分析，探索巨噬细胞表型与差异表达基因、纤维化

程度的相关性，并通过外部数据集鉴定NAFLD及肝纤维化中巨噬细胞的相关生物标记物，通过逆转录-聚

合酶链反应（RT-PCR）验证核心基因在不同巨噬细胞亚型中的表达差异。通过医学本体信息检索平台

Coreminemedical数据库，筛选NAFLD的中药治疗靶点并进行归纳分析。结果本研究共筛选出15个与

NAFLD及肝纤维化相关的核心基因。CIBERSORT算法分析结果表明，NAFLD的发生与多种免疫细胞相

关，其中M1型巨噬细胞在NAFLD组中显著升高，差异显著（P0.01），M1型巨噬细胞与肝纤维化程度呈正相

关，M2型巨噬细胞与肝纤维化程度呈负相关。核心基因与巨噬细胞的相关性分析结果显示，KDM4A、

MED30、IKBKG、ENO1、HSPA8与总巨噬细胞数呈负相关，IL-6、FOS、EDN2、NR4A2表达与M1型巨噬细胞数

呈负相关，而与M2型巨噬细胞数呈正相关。通过外部数据集验证及体外RT-PCR验证结果显示，在M2型

巨噬细胞中FOS、NR4A2mRNA的表达量高于M1型巨噬细胞（P0.001），与M1型巨噬细胞呈负相关，而与

M2型巨噬细胞呈正相关。其中基于核心靶点通过Coreminemedical数据库，根据药物功效与归经筛选出丹

参、牡丹皮、地黄、当归、泽泻、枳椇子、人参、山茱萸、山楂等相关中药，功效分析其主要集中在清热解毒、祛

湿化痰以及活血化瘀等方面，其中筛选频数最高的药物为牡丹皮。结论肝脏巨噬细胞是治疗肝病的靶细

胞，调控巨噬细胞M2极化有助于治疗NAFLD及相关肝纤维化，c-Fos、NR4A2可能是关键作用靶点，其中牡

丹皮等中药具有肝保护作用，为进一步研究NAFLD及肝纤维化的发病机制和治疗方法提供了新的参考。

关键词：非酒精性脂肪肝肝纤维化巨噬细胞标志物免疫浸润中药靶点

doi:10.11842/wst.20230302009中图分类号:R-058文献标识码:A

非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholicfattyliver总数将增加18.3%，其相关晚期肝病和肝脏相关死亡

disease，NAFLD）是临床上常见的与代谢功能障碍相率的病例数将增加一倍[2]。目前，NAFLD及肝纤维化

[1]，纤维化是该病[3]学说以及“多重打击”

关的肝脏疾病，全球患病率高达25%的发病机制复杂，“二次打击”

肝损伤的病理过程，与肝硬化和肝癌密切相关，严重学说，包括脂毒性、线粒体功能障碍、内质网应激、脂

危害了人类健康。据预测到2030年，NAFLD的病例肪组织功能障碍、炎性细胞因子以及肠源性内毒素等

收稿日期：2023-03-02

修回日期：2023-09-02

＊国家自然科学基金委员会青年科学基金项目：四君子汤改善结肠癌肿瘤浸润CXCR6+CD8+T细胞耗竭增强PD-1抑制剂疗效的