环境工程微生物学2025实验设计真题.docxVIP

环境工程微生物学2025实验设计真题

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、

请阐述在环境工程中，利用微生物降解持久性有机污染物（POPs）的意义。若要设计一个实验方案，以探究某特定微生物（例如，假设的*Pseudomonassp.*XY）降解多氯联苯（PCBs）的效率及其影响因素，请列出该实验设计需要考虑的关键要素，并详细说明如何设定对照组以排除其他因素的干扰。

二、

在废水处理生物膜系统中，微生物群落的结构和功能对处理效率至关重要。请设计一个实验方案，用于研究不同碳源（如葡萄糖、醋酸、乙酸钠）对生物膜内微生物群落结构（可考虑生理类群或特定目标基因）和关键功能基因（如降解特定污染物基因）表达的影响。请明确你的研究目标、主要实验步骤、需要测定的指标以及预期结果的分析方法。

三、

土壤重金属污染是重要的环境问题。设计一个实验方案，旨在评估某种植物修复菌（如假设的*Bacillussubtilis*ZM）对污染土壤中镉（Cd）的活化与迁移影响，并探讨其潜在的机制。请详细描述实验设计思路，包括土壤处理、接种、培养条件、Cd浓度测定方法、植物样品分析（如生物量、地上部Cd含量），以及如何分析该菌是否通过改变土壤pH值或与Cd形成络合物来影响Cd的生物有效性。

四、

高通量测序技术已被广泛应用于环境微生物组的分析。假设你需要设计一个实验方案，比较不同处理条件下（例如，传统活性污泥法vs.磁化活性污泥法）污水处理厂出水中细菌群落结构的差异。请简述实验设计要点，包括样品采集策略、实验室前处理方法、高通量测序技术选择（如16SrRNA测序或宏基因组测序）、数据分析的基本流程（如物种注释、多样性指数计算、差异菌群分析），并说明如何确保样品代表性和实验结果的可靠性。

五、

厌氧消化是处理有机废弃物和产沼气的重要技术，其效率受多种因素影响。请设计一个实验方案，研究初始有机负荷（COD浓度）和搅拌频率对食品加工厂废水中挥发性固体（VSS）去除率及甲烷产量的影响。请详细说明实验装置的选择（如UASB、CSTR）、污泥接种与驯化、实验运行参数（温度、pH）、取样频率、VSS和甲烷产量的测定方法，以及如何通过实验设计区分主效应和交互作用。

试卷答案

一、

意义：利用微生物降解持久性有机污染物（POPs）可以实现污染物的无害化处理，降低环境风险，避免POPs通过食物链富集危害人类健康，同时可能回收有价值的产品（如生物量或能源）。关键要素：1）明确目标微生物及其对POPs的降解能力；2）选择合适的培养体系（如纯培养、共培养、生物膜）；3）确定POPs浓度梯度，设置适宜的初始浓度和最终浓度；4）设定合适的培养条件（温度、pH、通气等）；5）选择可靠的降解效率测定方法（如化学分析法测定残留浓度、生物分析法测定毒性降低）；6）考虑时间因素，设定合理的培养时间。对照组设置：1）阴性对照：不接种微生物，仅添加POPs和基础培养条件，用于检测POPs的自然降解或挥发损失；2）空白对照：不添加POPs，只接种微生物和基础培养条件，用于测定微生物生长对基质的影响或背景值；3）（可选）添加抑制剂对照：在实验体系中加入微生物生长抑制剂，用于验证观察到的降解效果确实由微生物引起。

二、

研究目标：探究不同碳源（葡萄糖、醋酸、乙酸钠）对生物膜内微生物群落结构和关键功能基因表达的影响。实验步骤：1）制备生物膜：在固定表面（如玻璃片、填料）上培养微生物，形成生物膜；2）碳源切换：将生物膜分为三组（或更多，如加入其他碳源），分别用葡萄糖、醋酸、乙酸钠作为唯一碳源进行培养；3）样品采集：在培养不同时间点（如培养初期、中期、后期），从各组采集生物膜样品；4）样品处理：清洗生物膜去除可溶性物质，进行后续分析。需要测定的指标：1）微生物群落结构：通过高通量测序（如16SrRNA或宏基因组测序）分析微生物类群组成和丰度变化；2）功能基因表达：通过qPCR或RT-qPCR检测特定功能基因（如降解基因、代谢相关基因）的相对表达量。预期结果分析方法：使用生物信息学工具进行序列分析（如物种注释、多样性指数计算），比较不同碳源条件下群落结构的差异（如使用ANOVA、PERMANOVA）；使用统计学方法（如t检验、ANOVA）比较不同碳源条件下目标功能基因表达量的差异。

三、

实验设计要点：1）土壤准备：采集受Cd污染的土壤，可能需要进行风干、研磨、过筛等处理；2）实验设计：设置对照组（未接种菌的污染土）和实验组（接种植物修复菌*Bacillussubtilis*ZM的污染土），可设置不同接种量梯度；3）培养/种植：将土壤置于适宜容器中（如花盆、培养箱），种植相同品种和规格的指