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1+X可食食品快速检验资源库材料汇报芜湖职业技术大学汇报人:夏楠
水产品中氯霉素的快速测定
目录TaskdescriptionPART01任务描述PART02任务目标TaskobjectivePART03知识准备KnowledgepreparationPART04任务实施Taskimplementation
任务描述任务目标知识准备任务实施食品安全快速检测实验室采样员从生产线上采集一批食品样品,包括鱼、虾、鸡肉、猪肉等。作为检验员,你需要对这批食品样品进行氯霉素含量的快速测定,来初步判断样品是否违规添加了氯霉素,包括:样本处理;检测操作;结果的读取及报告。
任务描述任务目标知识准备任务实施01知识目标①掌握水产品中氯霉素的测定方法。②理解水产品中氯霉素的测定原理。02技能目标①会依据试剂盒说明进行水产品中氯霉素的测定。②会对最后的检测结果进行正确判定与报告。③了解水产品中氯霉素的测定意义。
任务描述任务目标知识准备任务实施一、氯霉素的检测意义氯霉素结构图氯霉素属广谱抗生素,可作用于细菌核糖核蛋白体的50S亚基,而阻挠蛋白质的合成,属抑菌性广谱抗生素,曾在畜牧业中广为应用。长期微量摄入氯霉素,不仅使人体肠道正常菌群失调,而且还会引起多种疾病,对人类的健康造成危害。世界上许多国家禁止此药用于生产食用动物,并规定了在畜产品中不得检出氯霉素。
任务描述任务目标知识准备任务实施二、氯霉素的危害第一:可逆的各类血细胞减少,其中粒细胞首先下降,这一反应与剂量和疗程有关,一旦发现,应及时停药,可以恢复。氯霉素不良反应会抑制骨髓造血功能。第二:不可逆的再生障碍性贫血虽然少见,但死亡率高。
任务描述任务目标知识准备任务实施二、氯霉素的危害01微生物法易操作,费用低,但灵敏度低,特异性差。02色谱法精确可靠、灵敏度高,检测限可达到0.1μg/kg,但前处理步骤多,回收率偏低。氯霉素检测方法包括微生物法、色谱法、免疫测定法。03免疫测定法精确可靠、灵敏度高,检测限可达到0.1μg/kg,但前处理步骤多,回收率偏低。
任务描述任务目标知识准备任务实施四、氯霉素的检测原理氯霉素的检测原理应用竞争抑制免疫层析的原理,样本中的氯霉素(CAP)在流动的过程中与胶体金标记的特异性抗体结合,抑制了抗体与NC膜检测线(T线)上的抗原-BSA偶联物的结合,从而导致检测线颜色深浅的变化,而无论样本中是否含有待测物质,质控线(C线)都会显色,以示检测有效。
任务描述任务目标知识准备任务实施一、组织样本处理1取100g以上去脂肪组织样品搅碎,称取2.0g均匀搅碎样品加入到15mL离心管中;2向15mL离心管中准确加入纯净水和提取剂各2mL,将瓶塞盖紧密封,用力振荡3min;3将上述样本4000转离心3min。4用吸管吸取上清液1mL到配套5mL离心管中,用氮吹或吹风机吹干,向吹干的5mL离心管中加入0.3mL稀释液,充分复溶离心管底部及内壁固体残留物,此溶解液即为待检液。
任务描述任务目标知识准备任务实施二、检测步骤吸取上述待检液120uL于金标微孔中,缓慢抽吸且充分与底部红色物质混匀,水平静置等待反应2min后,全部滴加到检测卡(S)孔中;第一步:加样后开始计时,5-8min即可观察结果,其他时间结果判读无效。第二步:
任务描述任务目标知识准备任务实施三、结果判读阴性(一):T线≥C线。阳性(+):C线显色,T线变浅或不显色。无效:质控区(C)未出现紫红色条带,表明不正确的操作过程或检测卡已变质损坏。
任务描述任务目标知识准备任务实施四、注意事项1.自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。2.要注意保证样品的新鲜,要注意避免因变质而造成的失效或污染。出现阳性结果时应建议用本卡复查一次或按法定程序分瓶封装样品用于确证法检测。3.本实验供定性筛查用,如需确证,请参照国家相关标准方法。
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