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磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定

一、实验目的

1.掌握磺胺类药物血浆药物浓度的测定方法

2.掌握药物半衰期的计算方法

3.了解药物血浆半衰期测定及计算的临床意义

二、实验原理

1.多数药物在体内按一级动力学规律消除,静脉注射后，如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其时量关系常呈直线。

2.药物血浆半衰期（halflife，T1/2）为：

Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1

二、实验原理

3.呈色原理：

磺胺类药物在酸性溶液中，与亚硝酸钠起重氮反应，生成重氮盐。此重氮盐在碱性溶液中与酚类

化合物起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。

偶氮化合物的显色深浅与磺胺的浓度有关。

三、实验动物

家兔（体重2.5Kg左右）

四、实验器材和药品

1.器材：分光光度计、离心机、兔手术台、手术器

械、动脉夹、动脉插管、磅秤、注射器、

移液管、离心管、试管等

分光光度计离心机

四、实验器材和药品

2.药品：20%磺胺嘧啶钠溶液、1%肝素钠溶液、

0.02%磺胺嘧啶钠溶液（标准液）、

7.5%三氯醋酸溶液、0.5%亚硝酸钠溶液、

0.5%麝香草酚溶液、20%NaOH溶液、

20%乌拉坦溶液、蒸馏水

五、实验步骤

（一）动物基本操作

（二）测定液和标准液的配制

（三）比色管的配制

（四）比色与计算

（一）动物基本操作(血液标本的采集）

1.抓取家兔1只，称重，用20％乌拉坦溶液5mL/kg行耳缘静脉麻醉，然后固定于手术台上。

2.气管插管

手术区剪毛，沿正中线剪开颈部皮肤，钝性分离皮下组织及肌肉，找出并游离气管，穿一根线备用。确定甲状软骨的位置，在其下3——4环装软骨处切一倒“T”形切口，插管固定。

(一)动物基本操作(血液标本的采集）

3.游离颈总动脉：分开肌肉层后，找出一侧颈总动脉并分离约2～3cm左右，在其下穿线两根线备用。

（一）动物基本操作

4.全身肝素化：耳缘静脉注射肝素5ml。

线1结扎远心端，待血管充盈后，动脉夹夹闭近心端

远心端剪一“V”形口，动脉插管，线2结扎固定（二次固定）

5.动脉插管（肝素润洗）

（一）动物基本操作

6.取血：打开动脉夹取空白血样2ml置于用肝素浸过的试管中待用；然后由耳缘静脉注射20％磺胺嘧啶钠溶液2ml/kg，于给药后10min及40min各取血2ml，分别置于同上试管中待用

（二）测定液和标准液的配制

测定液的配制：用1ml注射器抽取上述血液各0.2ml，置于已盛有5.8ml7.5％三氯醋酸溶液的玻璃试管中，充分摇匀，然后以1500r/min，离心5min待用。

标准液的配制：取0.02％磺胺嘧啶钠溶液0.2ml，加入已装有5.8ml7.5％三氯醋酸溶液试管中，摇匀待用。

成分

空白管（mL）

标准管

（mL）

测定管（mL）

给药前

给药10min

给药40min

测定液

/

/

1.5

1.5

1.5

标准液

/

1.5

/

/

/

蒸馏水

1.5

/

/

/

/

0.5％NaNO2

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5％麝香草酚

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

（三）各比色管的配制

蒸馏水

0.02%NaSD

②1组标本各取0.2ml加入2组

①2组各试管先加

三氯乙酸5.8ml

③2组测定液各取1.5ml清液加入3组

④加0.5mlNaNO2

⑤加1ml麝香草酚

标本

（1组）

测定液（2组）

比色液（3组）

空白管

标准管

给药前

药后10′

药后40′

取13支试管

分别用记号笔

标记

（四）比色与计算

用722型分光光度计进行比色，选波长520nm，以空白管调“0”点，读出标准管及各测定管光密度，并记录。

六、实验结果

标准管

测定管

给药前

给药后10min

给药后40min

光密度值

1.各比色管的光密度值

六、实验结果

2.计算Ke及T1/2

Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1

CNaSD=C标/OD标×（OD给药后-OD给药前）

七、注意事项

1.麻醉时一定把握好速度。

2.每次取血之前要先将残血放掉。

3.各盛血的试管及动脉插管要用肝素浸润，动脉插管前要先注射肝素(全身肝素化)。

4.将血样加到三氯醋酸试管中应边加边摇匀，否则易出现血凝块。

5.配制比色管的时候各个试管要做好标记。

6.加亚硝酸钠和麝香