任务三蛋白质的性质1蛋白质的紫外吸收性质2蛋白质的两性电离与等电点3蛋白质的胶体性质4蛋白质的变性5蛋白质的沉淀6蛋白质的颜色反应49课件讲解.pptx

1任务三、蛋白质的性质1、蛋白质的紫外吸收性质2、蛋白质的两性电离与等电点3、蛋白质的胶体性质4、蛋白质的变性5、蛋白质的沉淀6、蛋白质的颜色反应

蛋白质的性质33.1蛋白质的紫外吸收特性可见光400-800，400为紫外光，800红外光棱镜比色皿吸收光由于蛋白质分子中含有芳香族氨基酸，酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸，因此在280nm波长处有特征性吸收峰。蛋白质的OD（吸光度）280与其浓度呈正比关系，因此可作蛋白质定量测定。

蛋白质的性质33.2蛋白质的两性电离与等电点蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外，氨基酸残基侧链中某些基团，在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。蛋白质的等电点(isoelectricpoint,pI)当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。

蛋白质的性质33.2蛋白质的两性电离与等电点碱性酸性

蛋白质的性质3蛋白质在高于或低于其pI的溶液中为带电的颗粒，在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术,称为电泳(elctrophoresis)。根据支撑物的不同，可分为薄膜电泳、凝胶电泳等。3.2蛋白质的两性电离与等电点SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于蛋白质分子量的测定。等电聚焦电泳，通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技术。几种重要的蛋白质电泳:

蛋白质的性质3蛋白质属于生物大分子之一，分子颗粒的直径可达1～100nm，为胶粒范围之内。所以蛋白质具有胶体性质（布朗现象、丁道尔象限、不能通过半透膜等）3.3蛋白质的胶体性质蛋白质胶体稳定的因素:颗粒表面电荷水化膜－－－－－－－－

蛋白质的性质33.3蛋白质的胶体性质+++++++带正电荷的蛋白质－－－－－－－－带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质水化膜++++++++带正电荷的蛋白质－－－－－－－－带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒酸碱酸碱酸碱脱水作用脱水作用脱水作用溶液中蛋白质的聚沉若去除蛋白质表面电荷、水化膜，则蛋白质极易从溶液析出向溶液中加入中性盐破坏水化膜，调节pH至pI，将蛋白质沉淀。

蛋白质的性质33.3蛋白质的胶体性质透析及超滤法可去除蛋白质溶液中的小分子化合物应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留分子量的超滤膜，达到浓缩蛋白质溶液的目的。透析(dialysis)超滤法利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。蛋白质与低分子物质相比较,蛋白质分子扩散速度慢,不易透过半透膜,黏度大，可利用蛋白质的这一性质分离提纯。

蛋白质的性质33.4蛋白质的变性在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。变性的本质:——破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。物理因素：加热、加压、脱水、搅拌、超声等；化学因素：乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等

蛋白质的性质33.4蛋白质的变性变性的特点：1、理化性质改变，溶解度降低、粘度增加2、生物学活性丧失。如变性的疫苗会失活3、生物化学性质改变。应用举例:临床医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。此外,防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。

蛋白质的性质33.4蛋白质的变性若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能，称为复性(renaturation)。天然状态，有催化活性尿素、β-巯基乙醇去除尿素、β-巯基乙醇非折叠状态，无活性将尿素加入蛋白质中时，尿素会破坏多肽链之间结合时的非共价相互作用，从而使蛋白质失去自然构象的松散空间结构而变性。当去掉尿素时，蛋白质又会自发地重新复性恢复原来的空间构象。

蛋白质的性质33.5蛋白质的沉淀反应在蛋白质溶液中加人适当试剂,破坏蛋白质的水化膜或中和其分子表面的电荷，从而使蛋白质胶体溶液变得不稳定而发生沉淀,这种现象称为蛋白质的沉淀作用。变性蛋白质一般易于沉淀,但使蛋白质沉淀的因素不一定都使蛋白质变性，引起蛋白质沉淀的主要方法有下述几种:1.盐析2.生物碱试剂沉淀法3.重金属盐沉淀法4.有机溶剂沉淀法5.加热沉淀法

蛋白质的性质33.6蛋白质的颜色反应蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热，呈现紫色或红色，此反应称为双缩脲反应，双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度