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初中生物细胞分裂实验方案

一、实验名称

观察植物细胞的有丝分裂——洋葱根尖分生区细胞临时装片的制作与观察

二、实验目的

1.知识与技能：初步认识植物细胞有丝分裂的不同时期，识别各时期细胞的主要形态特征；学习制作洋葱根尖细胞临时装片的基本方法；熟练使用显微镜观察细胞结构。

2.过程与方法：通过动手制作装片和观察，体验科学探究的基本过程，学习控制实验条件（如解离时间、染色时间）的方法。

3.情感态度与价值观：培养对生物微观世界的探究兴趣，树立实事求是的科学态度，养成细致观察、规范操作的实验习惯。

三、实验原理

细胞分裂是生物体生长、发育和繁殖的基础。植物根尖分生区细胞具有旺盛的分裂能力，是观察细胞有丝分裂的理想材料。有丝分裂是真核细胞分裂的主要方式，具有周期性，一般分为间期和分裂期（前期、中期、后期、末期）。在分裂的不同时期，细胞核内的染色体（质）会发生规律性的变化。

本实验通过对洋葱根尖进行解离、漂洗、染色、制片等处理，使细胞分散开来并使染色体着色，再利用显微镜观察，从而识别细胞分裂的不同时期。常用的染色剂如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液，能将染色体染成深色，便于观察。

四、实验材料与用具

1.实验材料：洋葱鳞茎（或大蒜、葱）。

2.实验用具：显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿（若干）、刀片、镊子、滴管、吸水纸、铅笔（绘图纸）。

3.实验试剂：质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按1:1比例混合而成的解离液；清水；质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）。

五、实验步骤

（一）洋葱根尖的培养

提前3-5天，取洋葱鳞茎一个，剥去外层干枯鳞片叶，用刀片在其底部切去一小块，露出新鲜组织，然后将其置于盛有清水的广口瓶上，让底部接触水面。放置在温暖、有阳光的地方培养，每天换一次清水，待根长至约5厘米时即可取用。

（二）根尖的取材与固定

1.取材时间：一般在上午某个时段，此时根尖分生区细胞分裂较为旺盛（具体时间可根据当地气候和教学安排调整）。

2.取材操作：用镊子从洋葱根尖尖端切取约2-3毫米长的根尖（注意：务必取到根尖最前端的乳白色部分，即分生区），这是实验成功的关键。

（三）解离

将切取的根尖放入盛有解离液的培养皿中，室温下解离3-5分钟。解离的目的是使组织中的细胞相互分离开来，同时杀死细胞，固定细胞分裂相。解离时间不宜过短或过长：过短，细胞不易分散；过长，会导致细胞结构破坏。

（四）漂洗

待根尖酥软后（可用镊子轻轻触碰感觉），用镊子取出根尖，放入盛有清水的培养皿中漂洗约10分钟。漂洗的目的是洗去解离液，防止解离液继续作用影响后续染色效果，同时也是为了避免解离液腐蚀显微镜镜头。

（五）染色

将漂洗干净的根尖从清水中取出，用吸水纸吸去多余水分，然后放入盛有龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）的培养皿中染色2-3分钟。染色的目的是使细胞核内的染色体（或染色质）着色，便于观察。染色时间要适中，过浅则不易观察，过深则细胞内其他结构颜色过深，也会影响观察效果。

（六）制片（压片）

1.取一干净载玻片，在中央滴一滴清水。

2.用镊子将染色后的根尖取出，放在载玻片中央的清水中，用镊子尖轻轻将根尖弄碎，使细胞分散开。

3.盖上盖玻片：用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上的水滴，然后缓缓放下，以避免产生气泡。

4.压片：在盖玻片上再放一张吸水纸，用拇指轻轻按压（注意不要用力过猛，以免压碎盖玻片或使盖玻片移动），目的是使细胞进一步分散开，形成单层细胞，便于在显微镜下观察。

（七）观察

1.低倍镜观察：将制作好的临时装片放在显微镜的载物台上，先用低倍物镜（10×物镜）寻找根尖分生区细胞。分生区细胞的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。

2.高倍镜观察：找到分生区细胞后，移动物镜转换器，换用高倍物镜（40×物镜）仔细观察。调节细准焦螺旋，使物象清晰。辨认处于不同分裂时期的细胞，注意观察染色体的形态和分布特点。尝试找出间期、前期、中期、后期、末期的细胞。

六、实验结果与讨论

1.绘图：在绘图纸上绘制你所观察到的处于不同分裂时期的2-3个典型细胞图，并注明细胞分裂时期及细胞内可见的主要结构（如染色体、纺锤体、细胞核、细胞壁等）。

2.结果记录：统计视野中你所观察到的处于间期和分裂期各时期的细胞数量（可选取几个视野进行估算），填入自己设计的表格中。

3.讨论：

*你观察到的细胞中，处于哪个分裂时期的细胞数量最多？为什么？

*描述你所观察到的不同分裂时期细胞中染色体的形态和位置有何不同？

*若在你的视野中，细胞相互重叠，看不清楚，可能是什么原因造成的？应如何改进？

*实验过程中，你认为哪些步骤最为关键？为什么？

七、实