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3.4蛋白质工程的原理和应用
为什么这些细菌会发出不同颜色的荧光?因为在它们的体内导入了荧光蛋白的基因。最早被发现的荧光蛋白是绿色荧光蛋白改造黄色荧光蛋白及其他颜色的荧光蛋白这些荧光蛋白在细胞内生命活动的检测、肿瘤的示踪研究等领域有着重要应用。这个团块就是长在患儿肝脏上的肿瘤如何改造蛋白质?
一、蛋白质工程崛起的缘由按照人们的愿望,通过等技术,赋予生物以新的,创造出更符合人们需要的新的,又叫重组DNA技术。转基因遗传特性生物类型和生物产品知识回顾:基因工程概念1.基因工程的实质及不足①实质:基因工程是将一种生物的基因转移到另一种生物体内,使后者可以产生它本不能产生的蛋白质,进而表现出新的性状。②不足:基因工程原则上只能生产自然界中已存在(天然)的蛋白质。基因重组
一、蛋白质工程崛起的缘由1.基因工程的实质及不足(1)实质:基因工程是将一种生物的基因转移到另一种生物体内,使后者可以产生它本不能产生的蛋白质,进而表现出新的性状。(2)不足:基因工程原则上只能生产自然界中已存在(天然)的蛋白质。基因重组这些天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的它们的结构和功能符合特定物种生存的需要不一定完全符合人类生产和生活的需要
2.实例:赖氨酸合成调控达到一定浓度两种酶的活性二氢吡啶二羧酸合成酶天冬氨酸激酶+赖氨酸含量抑制提高提高限制提高提高5倍提高2倍异亮氨酸(352位)苏氨酸(352位)变为异亮氨酸(104位)天冬酰胺(104位)变为提高玉米赖氨酸含量
1.蛋白质工程概念:以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求。蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程,是涉及多学科的综合科技工程。思考:对天然的蛋白质进行改造,为什么不是直接对蛋白质分子进行操作,还是通过对基因的操作来实现的?①基因决定蛋白质的合成,改造了基因可以间接改造蛋白质;②改造基因可以遗传,改造蛋白质无法遗传;③改造基因比改造蛋白质更容易操作。二、蛋白质工程的基本原理2.蛋白质工程的目标:根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行设计改造。
2.天然蛋白质合成的过程:4.原理:中心法则的逆推预期功能生物功能设计蛋白质(三维结构)推测改造或合成转录翻译折叠行使目的基因mRNA多肽链从____________________出发→设计____________________→推测___________________→找到并改变____________________________或_____________→获得所需要的蛋白质预期的蛋白质功能预期的蛋白质结构应有的氨基酸序列相对应的脱氧核苷酸序列合成新基因3.蛋白质工程思路:
【思考?讨论】蛋白质工程基本思路的应用已知某多肽链的一段氨基酸序列是:丙氨酸苯丙氨酸色氨酸谷氨酸赖氨酸1.怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。查密码子表
【思考?讨论】蛋白质工程基本思路的应用已知某多肽链的一段氨基酸序列是:丙氨酸苯丙氨酸色氨酸谷氨酸赖氨酸1.怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。查密码子表得知:推知mRNA序列为:丙氨酸(GCU、GCC、GCA、GCG)、色氨酸(UGG)、赖氨酸(AAA、AAG)、谷氨酸(GAA、GAG)、苯丙氨酸(UUU、UUC)。GCU(或C或A或G)UGGAAA(或G)GAA(或G)UUU(或C)共种可能序列32
【思考?讨论】蛋白质工程基本思路的应用丙氨酸苯丙氨酸色氨酸谷氨酸赖氨酸已知某多肽链的一段氨基酸序列是:1.怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。GCU(或C或A或G)UGGAAA(或G)GAA(或G)UUU(或C)mRNA序列脱氧核苷酸序列GCT(或C或A或G)TGGAAA(或G)GAA(或G)TTT(或C)CGA(或G或T或C)ACCTTT(或C)CTT(或C)AAA(或G)
【思考?讨论】蛋白质工程基本思路的应用已知某多肽链的一段氨基酸序列是:丙氨酸苯丙氨酸色氨酸谷氨酸赖氨酸2.确定目的基因的碱基序列后,怎样才能合成或改造目的基因?学科交叉蛋白质工程经常要借助计算机来建立蛋白质的三维结构模型;要制备蛋白质晶体,然后通过X射线衍射技术,分析晶体结构;要用到基因的定点突变技术来进行碱基的替换。确定目的基因的碱基序列后,可以人工合成目的基因或从基因文库中获取目的基因。对基
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