第六章--细菌的遗传分析.pptVIP

第六章细菌的遗传分析

（3学时）;第一节细菌的细胞和基因组;;细菌染色体的复制;;;第二节细菌的结合与染色体作图;;Amet-bio-strs

×加链霉素

Bthr-leu-thi-strr

↓

基本培养基+str:

出现菌落;F因子的结构;F+与F-的结合;Hfr与F-的结合;三．细菌重组的特点;细菌重组的特点;中断杂交实验;二．中断杂交作图;根据中断杂交实验结果，确定基因间的图距（单位为时间min）;E.coli染色体为环形;例如根据中断杂交试验知lac和ade基因是紧密连锁的而且lac比ade先进入受体。

试验：Hfrlac+ade+strs×F-lae-ade-strr;lac—ade间重组率：;;二．性导;性导在大肠杆菌的遗传学研究中的作用;第五节细菌的转化与转导作图;转化机制：;转化基因间关系及其确定（共转化）;Nester等用枯草杆菌进行了如下实验：;二．细菌的转导与遗传作图;某种滤过因子将LT-2的基因传递给LT-22，后来的一系列实验证明该滤过因子为P22噬菌体。;2、普遍性转导;;普遍性转导：供体细菌的任何一个基因都可能被转移，且几率相等，这种转导为普遍性转导。转导颗粒：将细菌染色体片段包装在噬菌体蛋白质外壳内而产生的假噬菌体（不包含噬菌体的遗传物质）。

转导体：由转导颗粒形成的具有重组遗传结构的细菌细胞叫做转导体。

共转导（并发转导）：两个紧密连锁的基因往往可以一起被转导，这种结合转导现象叫共转导。;应用普遍性转导作图;例：P1→供体：thr+leu+azir×thr-leu-azis受体;P1供体菌：supC+trpA+pyrF+

↓

受体菌：supC-trpA-pyrF-

↓;如何用共转导率判断基因间的顺序？

supC-trpA=(36+114)/(36+114+453)=0.25

trpA-pyrF=36/605=0.06

supC-pyrF=36/605=0.06;如果把三个基因中每两个基因的共转导频率算出来，还可根据这一频率推算出三个基因之间的物理距离：;稳定转导与流产转导：

稳定转导：指外基因子重组到受体菌基因组中获得能稳定遗传的转导子。

流产转导：转导DNA进入受体细胞后，不与受体基因组交换，也不进行DNA复制，稳定独立存在于细胞中。使后代细胞中只有一个细胞具有转导DNA，其他细胞不含转导DNA，后代细胞发生分离。由于细菌不断增殖，故该转导类型的细菌所占比例越来越少，以至最终消失，故称为流产转导。;3、局限性转导;;低频转导：溶源性细菌中原噬菌体异常解离形成转导噬菌体（λdgal或λdbio）是缺陷噬菌体，感染gal-或bio-受体菌转导子频率很低，且转导子还不能产生噬菌体颗粒，这种转导叫低频转导。;;;作业题;2.假定你证明对过去一个从未描述过的细菌种有遗传重组，如使ab+菌株与a+b菌株混合培养，形成a+b+、ab的重组类型，试说明将采用哪种方式来确定这种重组是转化、转导还是接合的结果。;3．在普遍性转导中，供体大肠杆菌细胞的基因型是trpC+pyrF-trpA-，受体细胞的基因型是trpC-pyrF+trpA+。由P1噬菌体媒介转导，对trpC+进行选择，用选择的细胞进一步检查其他基因的转导情况，得到以下的结果：

基因型后代数目

trpC+pyrF-trpA-274trpC+pyrF+trpA-279

trpC+pyrF-trpA+2trpC+pyrF+trpA+46

试问：

（1）这3个基因的次序是什么？

（2）trpC和pyrF以及trpC和trpA的合转导频率是多少？

（3）假定P1染色体长为10μm，这些基因之间的物理图距是多少？;4．由一个野生型菌株抽提DNA，用来转化一个基因型为的突变型菌株。不同类转化子的菌落数目如下：

trp-?his-?tyr+?685??trp-?his+?tyr-??418

trp-?his+?tyr+?3660?trp+?his-?tyr-??2660

trp+?his-?tyr+?107??trp+?his+?tyr-??1180

trp+?his+?tyr+?11940?