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课题3酵母细胞的固定化阅读课题背景,说出酶应用过程中的问题与设想?
一基础知识(一)固定化酶的应用实例(1)高果糖浆的生产原理:葡萄糖异构酶果糖葡萄糖——生产高果糖浆
(2)葡萄糖异构酶固定:
(3)高果糖浆的生产操作:将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体上,装入反应柱中。从反应柱上端注入葡萄糖溶液,从下端流出果糖溶液,一个反应柱可连续使用半年。
(二)固定化细胞技术1.将酶或细胞固定化的方法将细胞(或酶)包埋在细微网格里将酶(或细胞)相互连接起来将酶(或细胞)吸附在载体表面上包埋法化学结合法吸附法
〖思考〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应,应当固定(酶、细胞);若将蛋白质变成氨基酸,应当固定(酶、细胞)。√√
(2)配制CaCl2溶液:0.83gCaCl2+150mL蒸馏水→200mL烧杯→溶解备用。
防止海藻酸钠焦糊(3)配制海藻酸钠溶液:0.7g海藻酸+10mL水→50mL烧杯→酒精灯微火(或间断)加热,并不断搅拌,使之溶化→蒸馏水定容到10mL。
(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合:将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入活化酵母细胞液,搅拌后吸入到注射器中。防止高温杀死酵母细胞
(5)固定化酵母细胞:以恒定速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中,形成凝胶珠状颗粒。原理?
2.用固定化酵母细胞发酵(6)冲洗:将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2~3次。(7)发酵:150mL10%葡萄糖+固定化酵母细胞→200mL锥形瓶→密封→25℃发酵24h。
发酵过程中锥形瓶为什么要密封?锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的?在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中,需要无菌操作吗?酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。酵母菌进行无氧呼吸产生的。需要。
例1.下列有关固定化技术的叙述,正确的是()A.固定化酶只是在细胞内才能发挥作用B.固定化酶能提高酶的利用率C.酶的固定是酶分离纯化的常用方法D.固定化酶的固定化方式就是吸附在固体表面上√
例2.关于固定化细胞的叙述,正确的是()A.催化效率高,低耗能、低污染B.对环境的条件非常敏感,容易失活C.既能与反应物充分接触,又能与产物分离D.成本低、操作简单,但反应效果可能很低√
例3.固定化酶的优点是A.有利于增加酶的活性B.有利于产物的纯化C.有利于提高反应速度D.有利于酶发挥作用√
例4.下列不是用于包埋法固定化细胞的载体是A.琼脂糖B.醋酸纤维素C.聚丙烯酰胺D.聚乙烯树脂√
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