3.1 重组DNA技术的基本工具课件-高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptxVIP

基因工程的诞生背景;;;基因工程的概念：

按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫DNA重组技术;基因工程利用的原理：基因重组

与诱变育种相比，其特点是定向改造生物遗特性

与杂交育种相比，其特点是克服远远杂交不亲和; 基因工程：又叫基因拼接技术或DNA重组技术。就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰和改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改变生物的遗传性状。;;;P70.科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因抗虫棉，使虫害得到有效控制。在培育转基因抗虫棉时，既要在体外对含有所需基因的DNA分子“切割”、改造和“拼接”；又要将重组DNA分子导入棉花体内，并使其表达。;第3章基因工程;课标要求;;问题一？;1.限制性内切核酸酶——“分子手术刀”;;;仔细观察以下四种限制酶识别的特定序列有何特点？;;;【例】各限制酶的识别序列和切割位点如下,请写出限制酶切割形成的末端。;;;;⑥如图DNA片段，B、C处为限制酶切点，问反应体系中加入酶后，能得到哪几种DNA片段？

（若问得到几种长度的片段，还要考虑切点间的距离）

如果是环状DNA呢？(右图);1.推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么？;;1.下列有关限制酶的叙述，错误的是(）

A.用限制酶从一个DNA分子中部获取一个目的基因时，4个磷酸二酯键断裂

B.限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越小

C.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端碱基数相同

D.用不同的限制酶处理含目的基因的片段和质粒，也可能形成重组质粒;;2.DNA连接酶——“分子缝合针”;;;;;【对位练】下图表示某种质粒和人的胰岛素基因，其中a表示标记基因，b表示胰岛素基因，E1表示某限制酶的切割位点，现用该种限制酶分别切割质粒和胰岛素基因，后用DNA连接酶连接切割后的质粒和胰岛素基因，下列选项中不可能出现的是();;;下列关于DNA连接酶的叙述，正确的是()

A.DNA连接酶不需要识别特定的脱氧核苷酸序列

B.一种DNA连接酶只能连接一种黏性末端

C.将单个脱氧核苷酸加到某个DNA片段末端，形成磷酸二酯键

D.连接两条DNA链上碱基之间的氢键;3.基因进入细胞的载体——“分子运输车”;质粒;3.基因进入细胞的载体——“分子运输车”;;3.基因进入细胞的载体——“分子运输车”;;[思考讨论];根据标记基因的作用，有同学认为在含有某种抗生素的培养基中筛选存活的受体细胞不一定是导入目的基因的受体细胞，这种说法是否合理？请解释。;某研究所的研究人员拟将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌的细胞内，已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，目的基因要插入基因B中，且大肠杆菌本身不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是()

A.导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒

B.抗生素抗性基因是目的基因表达的必要条件

C.成功导入重组质粒的大肠杆菌可以在含氨苄青霉素的培养基上生长

D.能在含链霉素的培养基中生长的大肠杆菌不一定符合生产要求;P98复习与提高T1;;思考：;1.DNA粗提取的原理;2.DNA鉴定的原理;3.DNA粗提取、鉴定步骤;[特别提醒]DNA的粗提取与鉴定实验成功的关键点;;寻根问底;噬菌体;实验原理

可以利用DNA、RNA、蛋白质和脂质在理化性质方面的差异，

对它们进行提取

DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精

DNA在不同NaCl溶液中的溶解度不同，可溶于2M的NaCl溶液中

2.在一定的温度下（沸水浴），DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，

因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂;1．30g洋葱切碎＋10mL研磨液，充分研磨。;3．2M的NaCl5mL＋丝状物或沉淀物。再加二苯胺试剂4mL混匀，沸水浴5min，冷却后观察到蓝色（不加DNA做对照）。;课堂练习;课堂练习