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中学生物专项实验操作手册

前言

生物学是一门以实验为基础的自然科学。实验不仅能够帮助我们直观理解抽象的生物学概念，更能培养观察能力、动手能力、分析问题和解决问题的能力，以及严谨的科学态度与创新精神。本手册旨在为中学生物专项实验提供标准化、规范化的操作指导。请同学们在实验前务必认真阅读相关内容，理解实验原理，熟悉操作步骤，严格遵守实验室规则和安全注意事项，确保实验顺利、安全地进行，并能从中获得最大的收获。

第一部分：显微镜的规范操作与细胞观察

实验一：光学显微镜的使用与动植物细胞观察

一、实验目的

1.学习并掌握光学显微镜的正确使用方法。

2.学会制作植物细胞（如洋葱鳞片叶内表皮细胞）和动物细胞（如人口腔上皮细胞）的临时装片。

3.观察并识别动植物细胞的基本结构，比较其异同点。

二、实验原理

显微镜是利用光学透镜成像原理，将微小物体放大，以便观察其细微结构的精密仪器。临时装片的制作是为了使观察材料保持新鲜、形态结构稳定，并能清晰地显示其特征。植物细胞具有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡等结构；动物细胞则具有细胞膜、细胞质、细胞核等结构，通常没有细胞壁和大液泡。

三、实验材料与用具

1.材料：洋葱鳞片叶、人体口腔上皮细胞（由实验者自己提供）。

2.试剂：清水、生理盐水（0.9%氯化钠溶液）、稀碘液（或龙胆紫溶液）。

3.用具：光学显微镜、载玻片、盖玻片、刀片、镊子、解剖针、滴管、吸水纸、纱布、铅笔（含HB和3B）、绘图纸、尺子。

四、实验步骤

（一）光学显微镜的认识与准备

1.取镜与安放：一手握住镜臂，另一手托住镜座，将显微镜从镜箱中取出。轻轻放置在实验台距边缘约一拳宽度、略偏左的位置，镜臂朝向自己。

2.对光：转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升。转动转换器，使低倍物镜对准通光孔（注意听到“咔哒”声，确保物镜到位）。打开光圈（或调大光圈），左眼注视目镜内，右眼睁开（便于同时画图）。转动反光镜，直至通过目镜看到一个明亮、圆形的视野。

（二）制作洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片（“擦→滴→撕→展→盖→染→吸”）

1.擦：用洁净的纱布将载玻片和盖玻片擦拭干净。

2.滴：在载玻片中央滴一滴清水。

3.撕：用镊子从洋葱鳞片叶内侧（内表皮）撕取一小块透明薄膜（尽量薄且无色素干扰）。

4.展：将撕下的薄膜放入载玻片中央的水滴中，用解剖针轻轻展平，避免产生褶皱。

5.盖：用镊子夹起盖玻片，使其一侧先接触载玻片上的水滴，然后缓缓放下，盖在要观察的材料上，以避免产生气泡。

6.染：在盖玻片的一侧滴加几滴稀碘液。

7.吸：用吸水纸在盖玻片的另一侧吸引，使碘液浸润标本的全部。

（三）观察洋葱鳞片叶内表皮细胞

1.放置装片：将制作好的临时装片放在载物台上，用压片夹固定，使观察对象位于通光孔中央。

2.低倍镜观察：从侧面注视物镜，转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直至物镜接近装片（约0.5厘米距离，避免压碎装片和损伤镜头）。左眼注视目镜，反向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直至看清物像。若物像不够清晰，可略微转动细准焦螺旋进行调焦。移动装片，将物像移至视野中央。

3.（可选）高倍镜观察：如需更细致观察，在低倍镜下将需要进一步观察的部位移至视野中央，转动转换器，换用高倍物镜。调节细准焦螺旋，使物像清晰。（高倍镜下视野会变暗，可适当调大光圈或换用凹面反光镜。注意：高倍镜下禁止使用粗准焦螺旋！）

（四）制作人口腔上皮细胞临时装片（“擦→滴→刮→涂→盖→染→吸”）

1.擦：同前。

2.滴：在载玻片中央滴一滴生理盐水（维持细胞正常形态）。

3.刮：用凉开水漱口后，用消毒牙签的钝端在自己口腔内侧壁轻轻刮几下（注意力度适中，避免刮伤）。

4.涂：将牙签上附有碎屑的一端放在载玻片中央的生理盐水中，轻轻涂抹几下，使细胞分散开来。

5.盖、染、吸：操作同洋葱装片制作。

（五）观察人口腔上皮细胞

方法同观察洋葱细胞，先低倍镜找到清晰物像并移至中央，再根据需要换用高倍镜。

（六）整理与收镜

1.观察完毕，先提升镜筒，取下装片。

2.用纱布将显微镜外表擦拭干净。若物镜、目镜镜头有污物，需用专用的擦镜纸擦拭。

3.转动转换器，使两个物镜偏向两旁（或对准通光孔），将镜筒缓缓降至最低处。

4.将反光镜恢复到直立位置。

5.将显微镜放回镜箱，妥善保管。

五、实验现象与记录

1.绘制所观察到的洋葱鳞片叶内表皮细胞结构图，并标注细胞壁、细胞膜（紧贴细胞壁，不易观察）、细胞质、细胞核、液泡等结构。

2.绘制所观察到的人口腔上皮细胞结构图，并标注细胞膜、细胞质、细胞核等结构。

3.比较动植物细胞在形态和结构上的异同点，记录于表格中。

六、实验结论与讨论

1.你所观察到的动植物细胞