2020年高三生物一轮复习备战2021-第28讲-基因工程-专题训练.docxVIP

备战2021高三生物一轮复习专题训练

第28讲基因工程

1.[2021湖北武汉局部学校质检]含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶，这两种酶(作用于DNA分子)有相同的作用序列，但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰，使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。答复以下问题：

(1)目前，基因工程中使用的限制酶主要是从生物中别离纯化获得的。构建基因组文库和cDNA文库的过程中需要使用DNA连接酶的是(填“基因组文库〞“cDNA文库〞或“基因组文库和cDNA文库〞)。

(2)为在短时间内大量获得目的基因，可用的技术是。目的基因获取之后，需要，此步骤是基因工程的核心。

(3)用酵母菌合成的人胰岛素和利用细菌合成的人胰岛素在空间结构上存在一定差异，其原因是。

(4)含有某种限制酶的细胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破坏细胞自身的DNA，其原因可能有①；②。

【答案】(1)原核基因组文库和cDNA文库

(2)PCR构建基因表达载体

(3)酵母菌是真核生物，其细胞中的内质网和高尔基体能对人胰岛素进行加工，而细菌那么不能

(4)细胞自身的DNA分子中没有该限制酶的识别序列甲基化酶对细胞自身的DNA分子进行了修饰

【解析】(1)基因工程中使用的限制酶主要来源于原核生物。构建基因组文库和cDNA文库的过程中都需要将DNA片段与载体连接起来，即两个过程都需要使用DNA连接酶。(2)利用PCR技术可以在短时间内大量扩增目的基因。构建基因表达载体是基因工程中的核心操作。(3)酵母菌和细菌分别是真核生物、原核生物，真核生物的细胞中分泌蛋白在核糖体中合成后还需要内质网和高尔基体的加工，而原核细胞中没有内质网和高尔基体，因此，用酵母菌合成的人胰岛素和利用细菌合成的人胰岛素在空间结构上有差异。(4)含有某种限制酶的细胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破坏自身细胞的DNA，原因可能是细胞自身的DNA分子中没有该限制酶的识别序列，也可能是细胞自身的DNA被甲基化酶进行了修饰。

2.[2021广东七校第一次联考]请答复以下问题：

(1)DNA序列分析的方法为基因序列图的绘制提供了可能。DNA合成仪的问世为、、的获得提供了方便。

(2)研究人员用大肠杆菌作生产菌，利用基因工程技术分别生产胰岛素两条链。由A、B两条肽链可推导出A、B对应基因的碱基序列，依据是。因为A、B对应基因中的脱氧核苷酸数量较少，常用的方法获取目的基因。

(3)检测A、B对应基因是否导入受体细胞时，常用作探针。检测A、B对应基因是否表达常用杂交方法。

(4)引导肽是由引导肽基因控制合成的一段多肽序列，假设在胰岛素的A、B肽链的前端加上引导肽序列，可将A、B肽链引导到大肠杆菌的细胞膜外，便于A、B肽链的提取。为实现上述目的，操作是。在以后的体外加工过程中，需要用切除引导肽。

【答案】(1)引物探针小分子量DNA基因

(2)氨基酸和密码子的配对关系和碱基互补配对原那么人工合成

(3)放射性同位素标记的A、B对应基因抗原—抗体

(4)将A、B对应基因连接在引导肽基因后肽酶

【解析】(1)DNA合成仪的问世为引物、探针、小分子量DNA基因的获得提供了方便。(2)根据蛋白质的氨基酸序列可以推测出mRNA的碱基序列，然后根据碱基互补配对原那么可以推测出基因的碱基序列。(3)检测目的基因是否导入受体细胞，可以采用放射性同位素标记的目的基因作为探针。检测目的基因是否表达，可采用抗原—抗体杂交的方法。(4)在胰岛素的A、B肽链的前端加上引导肽序列，可将A、B肽链引导到大肠杆菌的细胞膜外，据此可知将A、B对应基因连接在引导肽基因的后面，即可以到达上述目的。在以后的体外加工过程中，需要用肽酶切除引导肽。

3.[2021四省八校联考]钙依赖蛋白激酶(CDPK)在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用，科学家通过将CDPK基因导入拟南芥中，来获得具有抗性的新品种。如图为某种质粒和含CDPK基因的DNA片段示意图，图中标记了限制酶的切割位点。答复以下问题。

(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括。为了使CDPK基因插入质粒中，应选取两种限制性核酸内切酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。

(2)将获取的CDPK基因进行PCR扩增，目前在PCR反响中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是

。

(3)图中所示的质粒为Ti质粒，操作过程中需要把CDPK基因插入质粒的T-DNA片段中，T-DNA片段在转化中的作用是。可以用作探针检测CDPK基因是否导入拟南芥细胞，导入成功的标志是。

(4)为研究CDPK基因表达载体对拟南芥的遗传转化的影响，待转化后的拟南芥植株生长成熟后，采集其种子，播种于含的MS培养基中进行抗性筛选