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动物实验技能大赛参考题库及答案

一、基础理论题

1.问题：实验动物按微生物控制程度分为哪几类？各类的核心特征是什么？

答案：实验动物按微生物控制程度分为四类：（1）普通级（CV）：不携带人兽共患病和动物烈性传染病病原体，但允许携带非病原微生物；（2）清洁级（CL）：除普通级标准外，排除小鼠肝炎病毒、仙台病毒等条件致病微生物；（3）无特定病原体级（SPF）：无指定的病原微生物和寄生虫，允许携带非致病共生菌；（4）无菌级（GF）/悉生级（GN）：无菌级动物体内外无任何微生物，悉生级则人为接种已知微生物群落。

2.问题：简述实验动物选择的“3个匹配原则”及其具体内容。

答案：（1）种属匹配：根据实验目的选择生物学特性与人类或研究对象相近的动物（如大鼠用于高血压研究，因其肾素-血管紧张素系统与人类相似）；（2）品系匹配：不同品系动物遗传背景差异显著（如C57BL/6小鼠易患动脉粥样硬化，BALB/c小鼠对免疫刺激反应敏感）；（3）个体匹配：需考虑年龄（幼年动物代谢快，老年动物器官功能衰退）、性别（性激素影响药物代谢，如雌性大鼠对咖啡因清除率高于雄性）、体重（同一批实验动物体重差异应≤10%）。

3.问题：常用实验动物中，哪些动物对疼痛刺激的敏感性较低？哪些动物存在“食粪癖”需特别注意饲养管理？

答案：（1）疼痛敏感性较低的动物：家兔（痛觉阈值较高，常用于热板法镇痛实验）、豚鼠（对机械性疼痛反应弱，但对温度敏感）；（2）存在食粪癖的动物：大鼠（通过食粪补充维生素B族）、小鼠（幼鼠通过母鼠粪便获取肠道菌群），需注意笼具清洁频率（每日至少清理1次），避免粪便污染饲料导致实验误差。

4.问题：戊巴比妥钠与乌拉坦作为麻醉剂的主要区别是什么？分别适用于哪些实验场景？

答案：（1）戊巴比妥钠：短效巴比妥类药物，起效快（静脉注射1-2分钟），麻醉深度易控制，代谢主要通过肝脏（t1/2=2-4小时），适用于需快速麻醉且实验时间较短的场景（如急性生理指标测定）；常用剂量：小鼠50mg/kg（腹腔注射）、大鼠40mg/kg（静脉注射）。（2）乌拉坦：长效麻醉剂，起效慢（腹腔注射30分钟达峰），麻醉维持时间长（6-8小时），对呼吸抑制轻，适用于需长时间观察的慢性实验（如神经电生理记录）；常用剂量：大鼠1.2-1.5g/kg（腹腔注射），需注意其潜在致癌性，禁止用于长期毒性实验。

二、操作技能题

1.问题：描述小鼠尾静脉注射的完整操作流程，并说明常见失败原因及解决方法。

答案：操作流程：（1）预处理：将小鼠置于37℃恒温箱预热5分钟，使尾静脉扩张；（2）固定：左手拇指与食指轻捏小鼠颈部皮肤，中指、无名指、小指固定鼠尾，右手轻拉鼠尾使其伸直；（3）进针：选择尾静脉下1/3处（避开分叉），用75%酒精消毒后，持1ml注射器（4号针头）与尾静脉呈15°-20°角刺入，见回血后缓慢推注药物；（4）拔针：推注完毕后用棉签按压针孔30秒，避免出血。

常见失败原因及解决：（1）血管未显露：预热时间不足，可延长至8-10分钟或用45℃温水湿敷尾部；（2）针头穿透血管：进针角度过大（30°）或推注速度过快，应调整角度并缓慢推注；（3）回血不明显：可能因针头斜面仅部分进入血管，需轻微调整深度至回血顺畅。

2.问题：家兔耳缘静脉采血时，如何避免溶血？若出现采血困难，可采取哪些补救措施？

答案：避免溶血的关键：（1）采血前用75%酒精消毒耳缘皮肤，待干后操作（酒精未干会导致红细胞破裂）；（2）使用21G以下细针头（避免机械损伤红细胞）；（3）采血时避免过度挤压血管（挤压会导致组织液混入，渗透压改变引起溶血）；（4）血液沿管壁缓慢注入抗凝管（剧烈震荡会破坏红细胞膜）。

采血困难的补救措施：（1）轻弹兔耳促进血管扩张；（2）用温毛巾（40℃）湿敷耳缘1-2分钟；（3）选择对侧耳缘静脉或耳中央动脉（需注意动脉压力高，采血后需按压止血5分钟）；（4）若静脉严重塌陷，可皮下注射0.1%硝酸甘油0.1ml/只，扩张血管。

3.问题：大鼠腹腔注射的正确定位、进针角度及最大安全剂量是多少？误注入肠腔的表现及处理方法是什么？

答案：（1）定位：下腹部腹白线左侧1cm（避开膀胱和肝脏），或双侧肋弓下2cm与腹股沟连线中点；（2）进针角度：与皮肤呈30°-45°角，先刺入皮下，再垂直刺入腹腔（深度约1-1.5cm）；（3）最大安全剂量：成年大鼠（200-300g）单次注射量≤5ml（≤0.025ml/g体重）。

误注入肠腔的表现：推注时阻力增大，回抽可见肠内容物（浑浊液体或食物残渣）；处理方法：立即拔针，更换注射部位（如对侧腹腔），记录误注情况，必要时补注药物（需调整剂量，避免过量）。

4.问题：简述小鼠颈椎脱臼法