解码番茄成熟奥秘：NAC类基因的分离、鉴定与功能解析.docxVIP

解码番茄成熟奥秘：NAC类基因的分离、鉴定与功能解析

一、引言

1.1研究背景与意义

番茄（Solanumlycopersicum）作为全球广泛种植的重要蔬菜作物，不仅是人类饮食中维生素、矿物质和抗氧化剂的重要来源，还因其丰富的营养价值和广泛的应用领域，在食品工业和农业经济中占据着举足轻重的地位。番茄果实的成熟过程是一个复杂而精细的生物学调控过程，它涉及到一系列生理生化变化，包括颜色的转变、质地的软化、风味物质的合成以及香气的释放等。这些变化不仅直接影响番茄的品质和口感，还决定了其市场价值和货架期。因此，深入研究番茄果实成熟的分子机制，对于提高番茄的品质、延长其保鲜期以及推动番茄产业的可持续发展具有至关重要的意义。

在番茄果实成熟的分子调控网络中，转录因子起着关键的调控作用。它们通过与靶基因的启动子区域相互作用，激活或抑制基因的表达，从而调控果实成熟相关的生理生化过程。NAC（NAM、ATAF1/2、CUC2）类转录因子作为植物特有的一类转录因子家族，在植物的生长发育、逆境响应和果实成熟等过程中发挥着广泛而重要的作用。NAC类转录因子的共同结构特征是在其N端含有一个高度保守的NAC结构域，该结构域通常由150-160个氨基酸组成，负责与DNA结合以及蛋白质-蛋白质相互作用；而C端则是高度可变的转录激活或抑制结构域，决定了NAC转录因子的功能特异性。

近年来，随着分子生物学技术的飞速发展，越来越多的研究表明NAC类转录因子在番茄果实成熟过程中扮演着不可或缺的角色。它们参与调控乙烯的生物合成、叶绿素的降解、类胡萝卜素的积累以及果实细胞壁的代谢等多个关键过程，从而影响番茄果实的成熟进程和品质形成。然而，尽管目前已经对部分NAC类转录因子在番茄果实成熟中的功能有了一定的了解，但对于整个NAC转录因子家族在番茄果实成熟过程中的调控机制，仍然存在许多未知领域。例如，哪些NAC类转录因子在番茄果实成熟过程中发挥着核心调控作用？它们的靶基因有哪些？它们之间以及与其他信号通路之间是如何相互作用的？这些问题的解答将有助于我们深入理解番茄果实成熟的分子机制，为番茄品质改良和遗传育种提供理论基础和技术支持。

本研究旨在通过对番茄成熟相关NAC类基因的分离和功能初步鉴定与分析，筛选出在番茄果实成熟过程中起关键作用的NAC类基因，揭示其调控番茄果实成熟的分子机制。这不仅有助于丰富我们对植物果实成熟调控网络的认识，还为番茄品质改良提供新的基因资源和理论依据，具有重要的理论意义和实际应用价值。在理论方面，本研究将深入探讨NAC类转录因子在番茄果实成熟过程中的作用机制，进一步完善植物果实成熟的分子调控理论体系。在实际应用方面，通过对关键NAC类基因的功能研究，有望为番茄遗传育种提供新的分子标记和基因靶点，培育出具有优良品质、耐贮藏运输的番茄新品种，满足市场对高品质番茄的需求，推动番茄产业的健康发展。

1.2国内外研究现状

在过去的几十年里，国内外科研人员对番茄果实成熟的分子机制进行了广泛而深入的研究，取得了一系列重要成果。在转录因子调控果实成熟方面，研究发现乙烯响应因子（ERF）、WRKY、MYB、bHLH和NAC等多个转录因子家族参与了番茄果实成熟的调控过程。其中，NAC类转录因子由于其在植物生长发育和逆境响应中的重要作用，逐渐成为番茄果实成熟研究领域的热点。

国外研究中，一些团队利用基因编辑技术如CRISPR/Cas9，对番茄中的NAC基因进行敲除或过表达，研究其对果实成熟的影响。通过这些研究，鉴定出了多个与番茄果实成熟相关的NAC基因。例如，研究发现NAC转录因子NOR（NON-RIPENING）在番茄果实成熟过程中起着关键作用，nor突变体果实表现出明显的成熟缺陷，乙烯合成、类胡萝卜素积累和果实软化等过程均受到抑制。进一步研究表明，NOR可以直接结合到乙烯合成基因SlACS2和SlACS4的启动子区域，激活它们的表达，从而促进乙烯的生物合成，调控果实成熟。此外，还有研究发现SlNAP1等NAC转录因子通过调控赤霉素（GA）代谢途径，间接影响番茄果实的成熟进程。SlNAP1能够直接结合到GA降解基因SlGA2ox1和SlGA2ox5的启动子区域，激活它们的表达，降低GA水平，从而正向调控果实成熟。

国内研究也在番茄NAC类基因与果实成熟关系方面取得了显著进展。中国农业大学的研究团队利用Virus-inducegenesilencing（VIGS）技术系统筛选了在番茄果实成熟过程中表达量较高的NAC家族转录因子，发现Solyc07g063420（NOR-like1）基因沉默的番茄果实呈现明显的不均