生物化学检验实验室基本知识.pptVIP

第三章生物化学检验实验室基本知识;本章内容概要：;教学目的和要求：;一、纯水的制备方法;离子交换法：;优点:

除了可去除杂质离子以外兼具吸附电中性杂质和过滤颗粒杂质的作用。;电渗透法;炭吸附法:;超滤膜法;二、水的纯度检查;;;Ⅱ级水:临床实验室用水,一般实验检验;

Ⅰ级水:特殊实验如酶活性测定、电解质分析等;

Ⅲ级水:用做仪器、器皿的自来水清洁后冲洗.;实验用纯水的贮存、运输和使用:;第三节实验方法的选择;一、实验方法选择的目的;;应用：

由于技术要求太高，费用昂贵，这类方法不直接用于鉴定

常规方法的准确性，只用于评价参考方法与一级标准品。;应用：

能在条件优越的实验室作常规分析，主要用于鉴定常规方法，评价其误差大小、干扰因素并决定是否可以被接受；用于鉴定二级标准品和为质控血清定值；用于

商品试剂盒的质量评价。;（三）常规方法（routinemethod）;

项目

;标准品的分级：;;（二）二级标准品（次级参考物）;（三）控制物（质控物）;决定性方法一级标准品

参考方法二级标准品

常规方法控制物;四、实验方法选择的原则;

尽量选用国内外通用方法或推荐方法，便于方法

的规范化和质量控制，重点考虑实用性和可靠性。;;五、实验方法选择的步骤;初步试验包括：简单

标准曲线和重复性

质控血清和新鲜标本的重复实验

析浓度不同的标本，并与公认的参考方法的结果对比.;;;系统误差（systematicerror，SE）;分类:

CE：指由干扰物引起的使测定值与真值存在恒定大小的误差，误差大小与被测物浓度无关，而与干扰物浓度相关。

PE：指相对于被测物浓度有相同的百分比误差，误差的绝对量与被测物浓度成正比。

;随机误差（randomerror，RE）;

由测定仪器、试剂、环境等实验条件的改变以及分析人员操作习惯等因素的变化而引起。;(二)实验误差的表示方法：;相对误差和相对偏差：;48;;;;分类：;连续测定的精密度：;重复性精密度：;再现性精密度;（二）准确度：;影响因素：

系统误差、随机误差（了??）;;;;（一）重复性试验;(二)回收试验;回收浓度=分析标本测得浓度-基础标本测得浓度（实际测得值）;注意事项：

吸量准确；

加入标准液后，其实验样品的被子测浓度最好达到医学决定水平；

总浓度必须在方法分析范围内；

需加入高中低不同浓度回收试验，计算平均回收率；

加入标准液的体积一般在10%内；

重复2-3次。;(三)干扰试验;试验的方法:;注意事项

被试验的物质：胆红素、溶血、防腐剂、抗凝剂、药物等

可疑干扰物的浓度：干扰物浓度有可能达到病理标本最高浓度值。

本试验检测的误差包括方法特异度不高和干扰物作用引起的误差。

消除干扰常用方法

空白对照：试剂空白：常见

标本空白：内空白法和外空白法

物理、化学方法分离干扰物

双波长或多波长法检测排除干扰

误差较大又无法消除，则改进或更换方法。;(四)方法比较试验（对比试验）（熟悉）;①在进行临床化学常规方法的评价时，最好选择参考方法作为比较方法

②若采用已知偏差法，则有部分误差来自比较方法（与已知偏差一致的那部分误差），剩余的则属于侯选方法。

③若采用未知偏差法，分析误差可能来源于二者之一或两者都有，难以分析。;方法学评价实验小结;;（一）方法学性能指标：;制定性能标准，要反映临床应用与解释结果的要求（医学效用限度），又要基本符合实验室所能做到的技能状态。;（二）方法性能判断指标：;１、单值判断指标;（１）９０％可信区间、９５％可信上限和可信下限：;假如，Ｅu＜EA，则方法性能为可接受；

假如Ｅl＞EA，则方法必须改进，以减少误差，否则排除。

假如Ｅu＞EA，但Ｅl＜EA，说明仅有的数据不足以作出任何有关可接受性的结论，还需继续实验以收集更多的数据，以便对分析误差作出较好的估量;２、可信区间判断指标计算公式：;;第五节实验的诊断性能评价;诊断性能评价：;一、参考值和医学决定水平;;

水平１：提示需要进一步检查的阈值

水平２：提示需要治疗措施的界点

水平３：提出预后或要紧急处理的界值;二、诊断灵敏度、特异度、预测值和似然比;诊断试验和金标准的应用：;诊断试验结果和患病的关系：;（二）诊断敏感度ＳＥＮ（真阳性率ＴＰＲ）：临床诊断+诊断实验评价

（三）诊断特异度ＳＰＥ（真阴性率ＴＮＲ）：临