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胚胎工程;四、胚胎工程的相关技术
1、种类
体外受精
胚胎移植
胚胎分割
胚胎冷冻保存
性别控制
胚胎干细胞培养
2、操作对象生殖细胞、受精卵和早期胚胎细胞
3、理论基础胚胎发育学;从试管牛说起
我国大多数牛的品种,产肉量和产奶量与国际上用优良品种相比都有一定差距。比如我国目前每头奶牛年平均产奶量为3000kg左右,而国际良种母牛年平均产奶量可达1万千克;我国蒙古黄牛平均每头体重300kg左右,而澳大利亚纯种海福特牛两岁时体重就可达到800kg,因此需要从国外引进优良品种,。
而引进一头成年牛需要3万到5万元,如此高昂的价格,使得我们不可能靠大量引进良种牛来提高产量。那么能不能让引进的良种牛快速的大量繁殖呢?遗憾的是,牛的生育率很低,一头牛一胎一般只产一头犊牛,一生约生育四五次,如何解决这个难题呢?;牛的生育率虽然低,但母牛体内的卵母细胞相当多。公牛产生的精子数量就更多了,如果我们能够分别采集牛的精子和卵母细胞,让它们在体外完成受精,并发育成一个个小胚胎,再将这些胚胎移植到一个本地黄牛体内,借腹怀胎,不就可以实现良种牛的快速大量繁殖吗?;4、体外受精
1)定义
哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。
2)原理
人工模拟体内环境,包括营养、温度、pH等,使初级卵母细胞成熟,同时使精子获能,最终完成受精作用,并有计划地保存胚胎等。;3)步骤
a、卵母细胞的采集
方法一:促排卵法(适用于小动物)
先用促性腺激素处理,使其超数排卵,然后在适当时间从输卵管中冲出卵子,并使其直接与获能精子在体外受精。
方法二:机械破碎法
从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,在从卵巢中采集卵母细胞。
方法三:抽吸法(适用于大家畜和大动物)
借助超声波探测仪和内窥镜,直接从活体动物卵巢中吸取卵母细胞。(活体采卵)
注:1、采集的卵母细胞需在体外培养成熟后才能与获能精子受精。;b、精子的采集
方法一:假阴道法
用特制的假阴道满足雄性动物交配时对压力,温度和润滑度的要求,同时要配备有与供精动物相适应的台畜,训练动物爬跨台畜,借假阴道收集精液。
方法二:手握法
徒手或戴乳胶手套,直接把握雄性动物阴茎,施以适当压力和刺激即可引起射精,并可收集富含精子的精液。
方法三:电刺激法
采用特制的电极伸入动物的直肠,直接刺激位于腰荐部位的射精中枢,引起射精。此方法只适用于野生和某些经济动物。
;注:1、精子获能的处理方法
①培养法
将精子放入人工配制的获能液中培养一段时间。
②化学诱导法
将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,用化学药物诱导精子获能。
c、受精
获能精子和成熟卵细胞在体外合适的环境下共同培养一段时间,便可受精。受精后形成的受精卵须经早期发育培养,才能完成植入或着床。;5、胚胎移植“借腹怀胎”
1)定义
将雌性动物的早期胚胎或者通过体外受精等其他方式得到的胚胎,移植到同种生理状态相同的其他雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术。
2)实质
产生胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。;3)流程;4)生理学基础
①哺乳动物发情排卵后,不管是否妊娠,在一段时间内,同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的,这为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。
②哺乳动物的早期胚胎形成后,在一定时间内,不会与母体子宫建立组织上的联系,而是处于游离状态,这为胚胎的收集提供了可能。
③受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系,但移入受体的供体胚胎的遗传特性,在孕育过程中不受任何影响。
;5)意义
充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。
6)应用
提高优良品种家畜的繁殖能力;
加速品种改良速度;
保存品种资源和濒危物种。
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