基于LC-MS_MS技术同时定量分析片仔癀中特征胰酶水解肽.pdfVIP

2023年4月第25卷第4期中国现代中药ModChinMedApr.2023Vol.25No.4

·中药工业·

基于LC-MS/MS技术同时定量分析片仔癀中

特征胰酶水解肽△

111122*1*1

李文正，刘文静，曹妍，李玮，赵晨，刘丛盛，宋青青，宋月林

1.北京中医药大学中药学院中药现代研究中心，北京100248；

2.漳州片仔癀药业股份有限公司，福建漳州363000

［摘要］目的：阐明片仔癀中的蛋白组，定量分析其中的特征胰酶水解肽，以提高片仔癀的质量控制水平。方

法：优化总蛋白提取条件，采用二辛可宁酸（BCA）法测定总蛋白含量，利用鸟枪法蛋白组学表征片仔癀的蛋白

组，并进一步选择含量较高、稳定性好、长度适宜的特征多肽作为目标分析物，采用在线能量分辨质谱法（online

ER-MS）优化特征肽的离子对及最佳碰撞能，建立反相液相色谱-选择反应监测（RPLC-SRM）定量分析方法，测定

11批片仔癀中目标多肽的含量。结果：利用UniProt数据库从片仔癀中共鉴定了来源于200个蛋白的343个肽段，

以酶和骨架蛋白为主；筛选得到ALSSALHER、TLLEGEESR和VAPLGEEFR3个特征肽，以其作为目标分析物进

行定量分析，onlineER-MS优化3个特征肽的定量参数离子对分别为m/z492.3→799.4、517.3→819.4和509.3→

637.3，碰撞能分别为25.0、24.4、28.6eV。方法学验证符合定量要求，3个多肽类成分在各批片仔癀样品中均被

检出（ALSSALHER：0.06~0.44µg·g–1；TLLEGEESR：0.08~0.26µg·g–1；VAPLGEEFR：0.27~1.09µg·g–1），

含量差异较小，其中特征肽VAPLGEEFR的含量较高。结论：建立的方法可靠，可为富含蛋白类成分的中药制剂的

质量评价提供思路与方法。

［关键词］片仔癀；酶切特征肽；定量分析；选择反应监测；在线能量分辨质谱

［中图分类号］R286［文献标识码］A［文章编号］1673-4890（2023）04-0880-08

doi：：10.13313/j.issn.1673‑4890.20221024006

SimultaneousQuantitativeAnalysisofCharacteristicTrypticPeptidesinPienTzeHuangUsingLiquid

ChromatographyTandemMassSpectrometry(LC-MS/MS)

111122*

LIWen-zheng,LIUWen-jing,CAOYan,LIWei,ZHAOChen,LIUCong-sheng,

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