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2025/07/23单抗制备流程汇报人：_1751850234

CONTENTS目录01单抗概述02单抗制备流程03单抗相关技术04单抗的质量控制05单抗的应用领域06单抗的未来发展趋势

单抗概述01

单抗的定义单克隆抗体的起源单克隆抗体自1975年起源，K?hler与Milstein运用杂交瘤技术首次成功研发。单抗的结构特点单克隆抗体具备显著的特异性与一致性，源自单一B细胞克隆的生成，能够识别特定的抗原决定簇。单抗的生物工程通过基因工程技术，科学家可以设计和制备具有特定功能的单克隆抗体。单抗在医学中的应用单抗广泛应用于疾病诊断、治疗和研究，如癌症治疗中的靶向药物。

单抗的分类按来源分类根据来源不同，单抗可分为鼠源单抗、人源化单抗和全人单抗。按结构分类单克隆抗体根据其结构，可以分为IgG、IgM、IgA等多种类型，每种类型都具备其特有的生物学功能。按作用机制分类依据其作用原理，单克隆抗体分为阻断型、激活型和中和型等，适用于各种治疗目标。

单抗制备流程02

抗原制备与免疫抗原的设计与合成基因技术工程师利用基因编辑方法，创造出特定抗原，进而合成触发免疫反应的蛋白质或肽链。动物免疫选取适宜的实验动物，例如小鼠或兔子，采用注射抗原的方式使其免疫，从而诱发产生针对性的抗体。抗原的纯化与鉴定利用层析技术等方法纯化抗原，并通过ELISA等实验方法鉴定抗原的免疫原性。免疫血清的收集在动物体内产生足够的抗体后，通过心脏穿刺或颈动脉放血等方式收集免疫血清。

杂交瘤技术免疫小鼠制备对小鼠进行反复免疫以激发特定抗体生成，此为细胞融合工作的前提准备。脾细胞与骨髓瘤细胞融合融合免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞，从而生成杂交瘤细胞，这一过程是杂交瘤技术的关键环节。筛选与克隆化通过HAT选择培养基筛选出杂交瘤细胞，并进行克隆化培养，确保单克隆抗体的产生。

单克隆抗体筛选杂交瘤细胞的生成通过将B细胞与骨髓瘤细胞融合，形成能产生特定抗体的杂交瘤细胞。ELISA筛选技术采用酶联免疫吸附技术（ELISA）对能独特识别目标抗原的单克隆抗体进行挑选。流式细胞术筛选通过流式细胞术对杂交瘤细胞进行分选，快速准确地挑选出高亲和力的单克隆抗体。克隆化培养与验证对挑选出的单克隆细胞实施克隆培养，同时运用免疫学技术对其特性进行确认。

单抗的纯化按来源分类单克隆抗体按其来源，可以分为鼠源抗体、人源抗体、嵌合抗体以及全人源抗体，它们在免疫原性和使用方面各具特点。按结构分类抗体结构多样，据此可将单抗分为IgG、IgM、IgA等类别，各类型抗体各司其职。按作用机制分类单抗按作用机制可分为中和抗体、激动剂抗体、抗体偶联药物等，用于不同治疗策略。

单抗的鉴定免疫小鼠首先给小鼠注射特定抗原，使其产生针对该抗原的特异性B细胞。融合细胞对免疫小鼠的脾脏细胞进行融合处理，与骨髓瘤细胞结合，从而产生活化的杂交瘤细胞。筛选单克隆抗体采用ELISA等手段，挑选出能生成特定抗体的融合瘤细胞系。

单抗相关技术03

基因工程抗体单克隆抗体的起源单抗起源于1975年，由K?hler和Milstein通过杂交瘤技术首次成功制备。单克隆抗体的特性单克隆抗体具有极强特异性和统一性，能精准地识别并与特定的抗原部位结合。单克隆抗体的应用单抗广泛应用于疾病诊断、治疗和生物技术研究，如癌症治疗中的靶向药物。单克隆抗体的生产单抗制备过程包括细胞培养、精炼及品质监管等环节，以保证抗体产品的安全性及功效。

人源化单抗技术抗原的选择与制备挑选恰当的抗原对单抗的生产至关重要，它通常需经过提纯和加工处理，从而提升其免疫反应能力。免疫动物的选择常用的实验动物包括小鼠、兔子等，选择合适的动物对产生高效价抗体至关重要。免疫程序的设计构建科学合理的免疫程序，涉及免疫剂的用量、接种的间隔及注射方法，以促进强大的免疫效应。免疫效果的评估通过ELISA等方法检测血清中抗体的效价，评估免疫效果，为单抗的制备提供依据。

抗体药物偶联物杂交瘤细胞的生成通过将B细胞与骨髓瘤细胞融合，形成能够产生特定抗体的杂交瘤细胞。ELISA筛选技术通过酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选出可专一性识别目标抗原的单克隆抗体。有限稀释法通过连续稀释杂交瘤细胞培养液，确保每个培养孔中只有一个细胞生长，从而获得单克隆细胞。流式细胞术筛选采用流式细胞技术对融合瘤细胞实施挑选，依据细胞表面抗体的特性来完成筛选过程。

单抗的质量控制04

质量标准免疫小鼠制备通过多次接种免疫小鼠，激发其生成特异抗体，为接下来的细胞融合工作打下基础。脾细胞与骨髓瘤细胞融合将免疫小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞相结合，创造出杂交瘤细胞，这一步骤是杂交瘤技术中的关键环节。筛选与克隆化通过HAT选择培养基筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，并进行克隆化培养以获得单克隆抗体。

质量检测方法抗原的选择与制备选择合适的抗原是单抗制备