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血浆凝固酶试验-实验操作

同学们好，今天我们来学习《微生物检验技术》中的血浆凝固酶实验。通过本次学习，我们要知道血浆凝固酶试验的基本原理，了解其临床意义，最重要的是学会血浆凝固酶试验的操作。首先，血浆凝固酶是指能使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的人或兔的血浆发生凝固的酶类物质。致病性葡萄球菌大多能产生凝固酶，非致病性葡萄球菌不产生此酶。实验原理，致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，附着于细菌菌体表面，促使血浆中纤维蛋白原降解为纤维蛋白，从而使血浆凝固。实验材料，血浆、菌种、灭菌器、玻片、接种环。

实验操作：取一张洁净的载波片。用记号笔在玻片上做两个圆形标记区域，并标记待检菌菌名。点燃酒精灯或用灭菌器对接种环进行灭菌。用灭菌的接种环取血浆置于标记的圈内。接种环再次灭菌。用灭菌的接种环取金黄色葡萄球菌置于左侧标记的圈内血浆并进行混匀。接种环灭菌。用灭菌的接种环取白色葡萄球菌，置于右侧标记的圈内血浆并进行混匀。接种环灭菌。判断实验结果。如出现颗粒状凝集现象，即为血浆凝固酶试验阳性。若没有立即发生凝集，可轻摇玻片加速反应，仍无凝集现象发生则判断为阴性。注意事项，试验前可用生理盐水检测两种细菌有无自凝现象，以防假阳性结果出现。取兔血浆和两种细菌时，都要将接种环进行灭菌并待其冷却。试验结果应立即判读，放置时间过久会造成假阳性结果出现。临床意义，致病性葡萄球菌可引起疖、痈、蜂窝组织炎等局部化脓性感染，也可引起骨髓炎、心内膜炎、关节炎、肺炎等全身化脓性感染。致病性葡萄球菌还可产生毒素，引发食物中毒、肠炎、烫伤样皮肤综合症等。在临床上，部分血浆凝固酶试验阴性的葡萄球菌也可引起社区和临床的广泛感染，如女性尿路感染、人工瓣膜心内膜病变。腹膜透析的腹膜炎、血管移植物感染、人工关节感染等。通过此试验，我们要掌握血浆凝固酶试验是判断葡萄球菌有无致病性的一个重要鉴别试验。好，这节课就讲到这里，同学们下节课再见。