（50页PPT）流式基本介绍.pptVIP

T淋巴细胞的体外激活

与细胞因子的检测免疫调节:细胞因子/受体相互作用、共受体/配体相互作用病因学研究:AIDS、癌症、自身免疫性疾病病毒细菌抗原引发T细胞亚群反应机会感染导致细胞介导免疫反应药物/疫苗疗效评价化疗－免疫状态评价各种状态下免疫状态评价：移植、寄生虫、营养失调、创伤－手术、烧伤等HLA-B27HLA-B27是MHCI类抗原，在有核细胞上广泛表达HLA-B27的表达与强直性脊柱炎高度相关，在其它血清阴性骨关节病也有明显表达Reiter，s综和症、银屑病性关节炎、葡萄膜炎等使用流式细胞仪，可以快速、灵敏、准确地分析HLA-B27BDHLA-B27Kit检测HLA-B27，报告检测的平均荧光强度，根据界值判定，得到阴性/阳性结果。实验的灵敏度为100%，特异性为97.5%HLA-B27HLA-B27阴性样本HLA-B27阳性样本白血病与淋巴瘤免疫分型MIC分型形态学检查流式细胞仪免疫分型细胞遗传学检查白血病细胞的异常表现在系列异常和时间异常FCM通过检测细胞表面或胞浆特异性的标记表达来对白血病进行免疫分型，报告白血病细胞百分含量和各种免疫表型的分布情况白血病与淋巴瘤免疫分型CD45PerCP/SSC分析样本，画门Tohelpallpeoplelivehealthylives1973年BD推出世界第一台流式细胞仪 FACSI（FluorescenceActivatedCellSorter）1980年中国的第一台流式细胞仪FACSII生物学、免疫学、遗传学、药理学、肿瘤学、血液学、临床检验等领域FACS流式某省市场占有率：全球75%，中国70%台式机——FACSCalibur双激光：488nm/635nm四荧光六分析参数动化程度高分析速度快灵活的设计细胞分选系统 细胞富集系统大型机——FACSVantageSE多激光多波长八特征参数设计灵活高速分选单细胞点对点分选流式细胞术的基本概念流式细胞术（FlowCytometry,简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性，并加以定量的技术，同时可以对特定群体加以分选研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量流式细胞仪仪器结构液流系统光学系统 激光光源 光收集系统电子系统 光电转换 数据处理系统细胞分选系统流式细胞仪的检测范围细胞结构细胞大小细胞粒度细胞表面面积核浆比例DNA含量与细胞RNA含量蛋白质含量细胞功能细胞表面/胞浆/核的特异性抗原细胞活性细胞内细胞因子酶活性激素结合位点细胞受体流式细胞仪的检测信号散射光信号FSC，前向角散射光，代表细胞大小SSC，侧向角散射光，代表细胞粒度流式细胞仪的检测信号荧光信号使用荧光标记的单克隆抗体染色，做多色分析荧光信号的强弱，反映了细胞抗原的表达含量双激光立体空间激发系统双激光立体空间激发系统Laser1Laser2信号脉冲处理

PulseProcessing（DDM）DDM(DoubletDiscriminationModule)

双粘体辨别—DNA分析的解决之道 通过信号脉冲（FL2-W和FL2-A）分析区别实体组织标本中的粘连细胞，最大程度减少假阳性流式细胞仪的应用淋巴细胞免疫分型淋巴细胞亚群分析CD4绝对计数HIV的诊断与研究淋巴细胞CD4/CD8分析CD4绝对计数T细胞活化细胞移植的交叉配型和免疫状态监测流式细胞仪的应用免疫功能和免疫调控的研究淋巴细胞和单核细胞的活化细胞因子的研究淋巴细胞的增殖树突状细胞的研究HLA-B27检测流式细胞仪的应用白血病和淋巴瘤免疫分型残留白血病造血干细胞计数PNH诊断网织红细胞分析血小板分析血小板膜糖蛋白分子的表达血小板活化网织血小板分析流式细胞仪的应用细胞析肿瘤相关基因表达的研究多药耐药基因的研究细胞凋亡的分析凋亡细胞的分析凋亡相关蛋白的分析淋巴细胞亚群分析使用特异的单克隆抗体，进行多色分析，同时分析淋巴细胞上多种抗原的表达，可以将淋巴细胞亚群区分开，进行定量分析各淋巴细胞亚群的百分含量淋巴细胞亚群的绝对计数临床意义了解在不同情况下体内免疫功能状态辅助临床疾病的诊断探索疾病的发病机理、病程、预后监测、指导临床治疗方案免疫系统疾病免疫缺陷病，AIDS移植病人排斥反应或移植物抗宿主反应的检测肿瘤病人化疗后免疫力检测淋巴细胞亚群分