薄层色谱法检查操作规程.docVIP

XXX-XX-XX薄层色谱法检查操作规程PagePAGE2ofNUMPAGES6

操作标准

文件名称

薄层色谱法检查操作规程

起草人

起草日期

年月日

审核人

审核日期

年月日

质量部审核人

审核日期

年月日

批准人

批准日期

年月日

颁发部门

质量部

生效日期

年月日

分发部门

总经理[]份质量部[]份生产部[]份不良反应监测办[]份

工程部[]份物资部[]份行政部[]份质量控制实验室[]份

动物房[]份仓储[]份中药提取车间[]份技术研发部[]份

财务部[]份商务部[]份大容量注射剂车间[]份

变更内容

修订号修订原因与内容执行日期

1目的

建立薄层色谱法的操作方法和工作程序，确保实验结果的准确性，特制订本规程。

2适用范围

本标准适用于需要用薄层色谱法检查的所有样品。

3引用标准

《中国药典》

《中国药品检验标准操作规范》

4职责

质量控制实验室化验员：负责该规程的起草。

质量控制实验室主任：负责该规程的审核。

质量部经理：负责该规程的批准

内容

5.1定义

薄层色谱法系将供试品溶液点样于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比，亦可用薄成色谱扫描仪进行扫描，用于鉴别、检查或含量测定。

5.2原理

由于吸附剂对不同化合物的吸附力大小不同，当溶剂流过时，不同的物质在吸附剂之间发生连续不断地吸附，解吸附，再吸附，再解吸附。较难被吸附的化合物相对地移动得快一些，易被吸附的化合物相对地移动慢一些，经过一段时间的展开，不同的化合物就能达到分离的目的。

5.3仪器与材料

5.3.1薄层板

薄层板按支持物的材质分为玻璃板、塑料板或铝板等，按固定相种类分为硅胶薄层板、键合硅胶板、微晶纤维素薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。固定相中可加入黏合剂、荧光剂。硅胶薄层板常用的有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、和硅胶HF254、G、H表示含或不含石膏黏合剂。F254为在紫外光254nm波长下显绿色背景的荧光剂。按固定相粒径大小分为普通薄层板（10~40um）和高效薄层板（5~10um）。

在保证色谱质量的前提下，可对薄层板进行特别处理和化学改性以适应分离的要求，可用实验室自制的薄层板。固定相颗粒大小一般要求粒径10~40um。玻板应光滑、平整，洗净后不附水珠。.

5.3.2点样器

一般采用微升毛细管或手动、半自动、全自动点样器材。

5.3.3展开容器

上行展开一般可用适合薄层板大小的专用平底或双槽展开缸，展开时须能密闭。水平展开用专用的水平展开槽。

5.3.4显色装置

喷雾显色应使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器，要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出；浸渍显色可用玻璃器械或用适宜的展开缸代用；蒸气熏蒸显色可用双槽玻璃缸或适宜大小的干燥器代替。

5.3.5检视装置

为装有可见光、254nm及365nm紫外光源及相应滤光片的暗箱，可附加摄像头设备供拍摄图像用，暗箱内光源应有足够的光照度。

5.4操作方法

5.4.1薄层板的制备除另有规定外，将1份固定相和3份水（或加有黏合剂的水溶液，如0.2%~0.5%羧甲基纤维素钠水溶液，或为规定浓度的改性剂溶液）在研钵中按同一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2～0.3mm），取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下晾干后，在110℃活化30分钟，即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度，在反射光及透视光下检视，表面应均匀、平整、光滑，并且无麻点、无气泡、无破损及污染。

市售薄层板临用前一般应在110℃活化30分钟。聚酰胺薄膜不需活化。铝基片薄层板、塑料薄层板可根据需要剪裁，但须注意剪裁后的薄层板底边的固定相层不得有破损。如在存放期间被空气中杂质污染，使用前可用三氯甲烷、甲醇或二者的混合溶剂在展开缸中上行展开冲洗，晾干，110℃活化，置干燥器中备用。

5.4.2点样除另有规定外，在洁净干燥的环境中，用专用毛细管或配合相应的半自动、自动点样器械点样与薄层板上，一般为圆点状或窄细的条带状，点样基线距底边10