脑苷肌肽注射液成品检验标准操作程序.docVIP

脑苷肌肽注射液成品检验标准操作程序

文件目录：

TOC\o1-1\h\z\u325311.目的 2

307232.适用范围 2

14353.职责 2

257394.定义 2

76165.主要内容 2

267606.派生记录 7

316627.相关文件 7

91368.附件 8

49869.修订历史 8

1.目的

为规范和指导脑苷肌肽注射液成品的检验操作步骤及技术要求。确保实验结果的准确性，特制订本程序。

2.适用范围

本程序适用于脑苷肌肽注射液成品的检验。

3.职责

质量控制室人员：负责该程序的起草

质量控制室主任：负责该程序的审核

质量总监：负责该程序的批准

4.定义

不适用

5.主要内容

5.1引用标准

《脑苷肌肽注射液成品内控质量标准》

5.2品名

脑苷肌肽注射液

NaoganjitaiZhusheye

CattleEncephalonGlycosideandIgnotinInjection

5.3性状

本品为无色或微黄色澄明液体。

5.4鉴别

5.4.1取本品1ml，加茚三酮试液数滴，加热，应显紫色。

5.4.2取本品2ml，加40%氢氧化钠溶液0.5ml，摇匀，再加1%硫酸铜溶液1ml，溶液应显蓝紫色。

5.4.3取本品5ml，减压浓缩至干，加甲醇1ml溶解，离心，取上清液作为供试品溶液。另取单唾液酸四己糖神经节苷脂（GM1）对照品适量，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。参见《薄层色谱法标准操作规程》试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-0.2%的氯化钙溶液（8：13：2）为展开剂，展开后，晾干，喷以间苯二酚溶液（取2%间苯二酚溶液10ml，加2.5%硫酸铜溶液0.25ml，加盐酸80ml，加水至100ml，混匀），喷后即加玻片封盖（两玻片间需用夹夹紧）120℃加热至斑点清晰，供试品溶液所显主斑点的颜色及位置应与对照品溶液的主斑点相同。

5.5检查

5.5.1pH值

取本品10ml，依法测定（参见《pH值测定法标准操作规程》），pH值应为6.7～7.8。

5.5.2蛋白质

取本品1ml，加20%磺基水杨酸溶液1ml，不得产生浑浊。

5.5.3高分子量物质

参见《高效液相色谱法标准操作规程》，依法测定。

色谱条件与系统适用性试验用凝胶色谱柱（如TSKGEL2000SWXI7.8mm×300mm，5um）；流动相为三氟醋酸-乙腈-水（0.05：10：90）；检测波长为214nm。理论板数按胰岛素峰计算应不低于3000。

参比溶液的制备取胰岛素（分子量5800）适量，用流动相制成每1ml中含1mg的溶液。

供试品溶液的制备取原液。

测定法取参比溶液和供试品各20μl，分别注入液相色谱仪。记录色谱图，供试品溶液色谱图小于胰岛素峰保留时间的峰面积，按面积归一化法计算，不得过4.0%。

5.5.4活力

取本品，照呼吸活力测定法（附件一）测定，从测得的耗氧量计算出刺激指数（SI）应不小于1.8。

5.5.5异常毒性

取本品，依法检查（参见《异常毒性检查法标准操作规程》），按静脉注射法检查，应符合规定。

5.5.6过敏试验

取体重250～350g健康豚鼠6只，间日腹腔注射本品0.5ml，连续3次，在第三次注射后的第十四天，自静脉注射本品1.0ml，注射后15分钟内观察动物，均不得出现连续干咳、连续前爪抓鼻、明显耸毛、四肢发软、躺卧、呼吸困难、痉挛、虚脱及死亡现象。连续观察3天，动物应健存。

5.5.7细菌内毒素

取本品1支，参见《细菌内毒素检查法标准操作规程》，依法检查，每1ml中含细菌内毒素的量应小于5EU。

5.5.8降压物质

取本品，参见《降压物质检查法标准操作规程》，依法检查，剂量按猫体重每1kg注射1ml，应符合规定。

5.5.9无菌

取规定量供试品（60支/柜），转移至100ml0.1%蛋白胨水溶液中，采用薄膜过滤法过滤后，分别接种相应培养基，同时以金黄色葡萄球菌〔CMCC（B）26003〕为阳性对照菌，参见《无菌检查法标准操作规程》，依法检查，应符合规定。

5.5.10装量

取本品，参见《注射剂装量检查法标准操作规程》，依法检查，应符合规定。

5.5.11可见异物

参见《可见异物检查法标准操作规程》，依法检查，应符合规定。

5.5.12不溶性微粒

取本品30ml，参见《不溶性微粒检查法标准操作规程》，依法检查，应符合规定。

5.6含量测定

5.6.1多肽