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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T3064●5—2011
国境口岸蝇类、蜚蠊携带重要病原体
检测方法
第5部分:普通变形杆菌和奇异变形杆菌
Detectionsofimportantpathogensinfliesandcockroachsatfrontierport—
part5:proteusvulgar,sandproteusm,rab,l,s
2011-09-09发布2012-04-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
发
布
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I
SN/T3064.5—2011
前言
SN/T3064《国境口岸蝇类、蜚蠊携带重要病原体检测方法》分为11部分:
———第1部分:通用要求;
———第2部分:沙门氏菌;
———第3部分:志贺氏菌;
———第4部分:致泻性大肠杆菌;
———第5部分:普通变形杆菌和奇异变形杆菌;
———第6部分:霍乱弧菌;
———第7部分:副溶血性弧菌;
———第8部分:金黄色葡萄球菌;
———第9部分:蜡样芽孢杆菌;
———第10部分:甲型肝炎病毒;
———第11部分:寄生虫卵(包囊)。
本部分为SN/T3064的第5部分。
本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。
本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本部分起草单位:中华人民共和国天津出入境检验检疫局。
本部分主要起草人:张海滨、刘培、关淳、高旗利、张霞、何晨光。
SN/T3064.5—2011
1
国境口岸蝇类、蜚蠊携带重要病原体
检测方法
第5部分:普通变形杆菌和奇异变形杆菌
1范围
SN/T3064的本部分规定了国境口岸输入性蝇类和蜚蠊携带普通变形杆菌和奇异变形杆菌的检测方法、结果判断、结果报告及阳性结果处置。
本部分适用于检验检疫机构对输入性蝇类和蜚蠊携带普通变形杆菌和奇异变形杆菌的检测和报告。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
3样本检测
3.1培养基和试剂
需要的培养基和试剂为GN增菌液,伊红美蓝琼脂(EMB),营养琼脂(NA),SS琼脂,尿素琼脂,蛋白胨水,克氏双糖培养基,苯丙氨酸培养基,鸟氨酸脱羧酶试验培养基,明胶培养基,糖发酵管。具体成分及制备方法见GB/T4789.28。除另有规定外,所用试剂为分析纯或生化纯,水为蒸馏水。
3.2检测程序
变形杆菌和奇异变形杆菌检测程序参见附录A。
3.3操作步骤
3.3.1增菌与分离
分别取1mL样本处理液加入到100mLGN肉汤中,将GN肉汤放入温箱中,置于36℃±1℃,培养18h~24h。摇匀GN增菌液,取一环GN增菌液,四区法划线分别接种于SS琼脂和EMB琼脂平板,置36℃±1℃培养18h~24h。观察是否有可疑菌落生长,如有可疑菌落,从平板上至少挑取2个可疑菌落进行鉴定。
普通变形杆菌和奇异变形杆菌在SS琼脂上的典型菌落特征为:1mm~2mm大小,无色半透明或有黑色中心,边缘整齐,表面光滑的圆形菌落。
在EMB上呈透明或半透明、光滑、波纹状蔓延生长菌落。
3.3.2纯培养
从SS琼脂和EMB琼脂平板上各挑取可疑菌落,划线接种NA平板培养基,置36℃±1℃,培养过夜,进行以下试验。
2
SN/T3064.5—2011
3.3.3革兰氏染色
变形杆菌为革兰氏染色阴性杆菌,不形成芽孢。
3.3.4初步生化鉴定
分别接种纯培物于克氏双糖琼脂、尿素琼脂、苯丙氨酸琼脂各一管。于36℃±1℃,培养18h~24
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