rna的生物合成和加工.pptVIP

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转录与基因表达调控;一、转录——DNA指导下RNA的合成;DNA复制:以DNA为模板合成DNA,遗传信息自上一代细胞向下

一代细胞传递;(一)模板;1.模板:DNA

2.合成方向:5′→3′

3.酶:均依赖DNA

4.碱基互补配对原则

5.产物:多聚核苷酸链;不同点:;(二)参与转录的酶;RNA链的转录起始于DNA模板的一个特定位点,

其上游有特异的碱基序列,为启动子(promoter)

并在另一位点处终止(终止子terminator)

此转录区域称为转录单位(DNA);大肠杆菌的RNA聚合酶

全酶由5种亚基α2ββ’σ组成,σ因子与其它部分的结合不是十分紧密,它易于与β’βα2分离,没有σ亚基的酶称为核心酶——只催化链的延长,对起始无作用。

四种亚基的功能分别为:

α亚基:与启动子结合功能。

β亚基:含催化部位,起催化作用,催化形成磷酸二酯键。

β’亚基:与DNA模板结合功能。

σ亚基:识别起始位点。

;8~14个亚基,Mw500KD左右

无σ识别亚基

转录:起始复合体(转录因子、启动子、RNA聚合酶)

线粒体、叶绿体RNA聚合酶类似于原核生物

mRNA不稳定,寿命短,RNA聚合酶Ⅱ最重要;σ识别正确的启动位点,启动子的结构至少由三部分组成:

-35序列提供了RNA聚合酶全酶识别的信号;-10序列是酶的紧密结合位点(富含AT碱基,利于双链打开);第三部分是RNA合成的起始点。

;单独的核心酶

与DNA随机疏松结合(低亲和力),不能区分启动子和一般序列;启动子和转录因子;2、转录的起始;3、转录的延伸;第一个碱基总是G或A;4、转录的终止;Date;2)真核生物的转录终止;二、转录后加工;(一)原核生物的rRNA加工;(二)原核生物的tRNA加工;真核mRNA的剪辑;外显子(exon);Date;Date;真核mRNA剪接:切除内含子、拼接外显子;Date;Date;Date;原核细胞基因表达转录调控方式;原核细胞转录水平的调节——操纵子学说;乳糖操纵子(lacoperon);阻遏蛋白的负性调节

当无诱导物乳糖存在时,调节基因编码的阻遏蛋白(repressorprotein)处于活性状态,阻止RNA聚合酶与启动基因的结合,则无法启动转录。

当有乳糖存在时,乳糖进入细胞,经β-半乳糖苷酶催化,转变为半乳糖。后者作为一种诱导剂???子结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导致阻遏蛋白与O序列解离、转录发生。

;mRNA;mRNA;CAP(分解代谢基因活化蛋白)的正性调节

当没有葡萄糖及cAMP浓度较高时,cAMP与CAP结合,可刺激RNA转录活性。葡萄糖的分解代谢产物能降低cAMP的浓度,CAP不能被活化形成CAP-cAMP复合物,则不能转录。

lac阻遏蛋白负性调节与CAP正性调节两种机制协调合作:当Lac阻遏蛋白封闭转录时,CAP对该系统不能发挥作用;但是如果没有CAP存在来加强转录活性,即使阻遏蛋白从操纵序列上解聚仍几无转录活性。

lac操纵子强的诱导作用既需要乳糖存在又需缺乏葡萄糖。;阻遏蛋白;真核细胞基因转录的调控;反式作用因子(trans-actingfactors)

与顺式作用元件进行特异性结合的蛋白质因子

TBP(TATAboxbindingprotein)是唯一能识别TATA盒并与其结合的转录因子,是三种RNA聚合酶转录时都需要的;

不同基因由不同的上游启动子元件组成,能与不同的转录因子结合,这些转录因子通过与基础的转录复合体作用而影响转录的效率。

同一DNA序列可被不同的蛋白因子所识别;能直接结合DNA序列的蛋白因子是少数,但不同的蛋白因子间可以相互作用,因而多数转录因子是通过蛋白质-蛋白质间作用与DNA序列联系并影响转录效率的;蛋白质的锌指结构;逆转录:以RNA为模板合成DNA;Date;;;;;

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