第三章污染物的生物效应检测.pptVIP

第三章污染物的生物效应检测

;第一节生物测试及方式;一、生物测试（Bioassay）的概念：

;（二）受试生物的选择

（1）对试验毒物或者因子要具有敏感性

（2）具有广泛的地理分布和足够的数量，并在全年中在某一区域范围内可获得

（3）是生态系统的重要组成，具有重大的生态价值

（4）在实验室内易于培养和繁殖

（5）具有丰富的生物学背景资料，人们已经清楚了解受试生物的生活史、生长、发育、生理代谢等等

（6）受试生物对试验毒物或因子的反应能够被测定，并具有一套标准的测定方法或技术

（7）受试生物应具有重要的经济价值和旅游价值，应考虑与人类食物链的联系。;

影响生物测试结果的因素

受试生物：年龄，生活阶段，尺寸大小，季节等。

试验条件：温度，水质，水流速度等。

实验室差异：人员造作水平，仪器设备，统计分析方法。

（三）生物测试的标准化

（1）不同的实验室进行许多有用的测试并把一致的测试结果选择出来

（2）增加数据的准确性

（3）测试可以被其他实验室重复

（4）各种人员容易进行该试验

（5）可方便的将数据进行比较

（6）可为环境管理，环境立法提供可靠的数据或者结果

;第二节一般毒性试验;一、生物毒性的基本概念

毒物（Toxicant）的概念

任何能以较小剂量作用于机体，通过化学作用造成机体损害乃致死亡者，称毒物。

毒物与非毒物之间不存在绝对的界限，通常一种物质只有达到中毒剂量时才是毒物。

中毒（Intoxication）

生物体受到毒物作用引起功能或器质性改变后出现的疾病状态。

中毒是各种毒性作用的综合表现，包括急性中毒、亚急性中毒、慢性中毒。

毒性（Toxicity）

指一种物质引起机体损伤的能力。

毒性作用或毒效应（ToxicEffect）;剂量－效应关系和剂量－反应关系曲线图;;;;二、急性毒性试验（AcuteToxicityTest）;动物急性毒性试验（1）;动物急性毒性试验（2）;2、实验动物的选择

亚慢性毒性作用研究一般要求选拔两种实验动物，一种为啮齿类，另一种为非啮齿类，如大鼠和狗，以便全面了解受试物的毒性特征。

由于亚慢性毒性试验期较长，所以选择被动物的体重(年龄)应较小，如小鼠应为15g左右，大鼠100g左右。

3、染毒途径

亚慢性毒性试验接触外来化合物途径的选择，应考虑两点：一是尽量模拟人类在环境中接触该化合物的途径或方式，二是应与预期进行慢性毒性试验的接触途径相一致。具体接触途径主要有经口、经呼吸道和经皮肤三种。

;4、观察指标;;（二）慢性毒性试验;;染毒组剂量的选择可参考三组数据。一是以亚慢性阈剂量为出发点，即以亚慢性阈剂量或其1/5~1/2剂量为慢性毒性试验的最高剂量，以这一阈剂量的1/50~1/10为慢性毒性试验的预计阈剂量组，并以其1/100为预计的慢性无作用剂量组；一是以急性毒性的LD50剂量为出发点，即以LD50的1/10剂量为慢性试验的最高剂量。以LD50的1/100为预计慢性阈剂量，以LD50的1/1000为预计的无作用剂量组。各染毒剂量组之间的剂量间距应当大些，有利于求出剂量-反应关系，也有助于排除实验动物个体敏感性差异。组间剂量差一般以5~10倍为宜，最低不小于两倍。;7、观察指标

体重、食物摄取、临床症状、行为、血象和血液化学、尿的性状及生化成分以及重点观察在亚慢性毒性试验中已经显现的阳性指标。

注意三点：

一是试验前应对一些预计观察指标，尤其是血、尿常规及重点测定的生化指标进行正常值测定，废弃个体差异过大的动物；

二是在接触外来化合物期间进行动态观察的各项指标，应与对照组同步测定；

三是各化验测定方法应精确、可靠、且进行质量控制。;（二）试验方法;;第三节生物的分子和细胞水平检测;;第四节生物致突变、致畸和致癌效应检测

;一、致突变试验;（二）试验方法（Ames试验）;二、致畸效应;化学致畸作用机理

突变引起胚胎发育异常；

对细胞的生长分化较为重要的酶类受到抑制；

母体正常代谢过程被破坏；

细胞分裂过程的障碍

;（二）致畸试验

1、目的：检测环境污染物能否通过妊娠母体引起胚胎畸形。

2、受试生物的选择：一般试验动物要求其对化学物质的代谢过程与人相似，胎盘结构也相似，还要求孕期短，产仔多，经济实用，如家兔、大鼠、小鼠等。

3、剂量分组：正式试验最少应设3个剂量组，另设对照组。如受试物溶于某种溶剂中给予动物，则另设溶剂对照组。有时为了更好地验证试验结果，另设阳性对照组。原则上，最高剂量组该剂量一般不超过LD50的1/5-1/3，应引起母体轻度中毒，即进食量减少、体重减轻、死亡不超过10%；最低剂量