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2025年生化岗位考核试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.关于蛋白质三级结构的描述，正确的是：

A.由两条或两条以上多肽链通过非共价键结合形成

B.主要依靠二硫键维持稳定性

C.是指整条多肽链中所有原子的空间排布

D.无规卷曲不属于三级结构的组成部分

答案：C

解析：蛋白质三级结构指整条多肽链中所有原子的三维空间排布，主要靠疏水键、离子键、氢键和范德华力维持，二硫键可增强稳定性但非主要；两条以上多肽链的空间排布为四级结构；无规卷曲是二级结构的常见形式之一。

2.在酶动力学实验中，若加入竞争性抑制剂，其Lineweaver-Burk双倒数作图的特征是：

A.横轴截距（-1/Km）增大，纵轴截距（1/Vmax）不变

B.横轴截距不变，纵轴截距增大

C.横轴截距减小，纵轴截距减小

D.横轴截距与纵轴截距均增大

答案：A

解析：竞争性抑制剂与底物竞争酶的活性中心，导致Km增大（亲和力降低），但不影响Vmax（增加底物浓度可完全抵消抑制）。双倒数方程中，1/V=(Km/Vmax)(1/[S])+1/Vmax，故纵轴截距1/Vmax不变，横轴截距-1/Km因Km增大而更接近原点（即绝对值增大）。

3.下列关于CRISPR-Cas12a系统的描述，错误的是：

A.切割靶DNA后产生粘性末端

B.依赖PAM序列（TTTV）识别靶位点

C.可同时切割多个靶标（multiplexing）

D.切割活性不依赖于向导RNA（gRNA）的精确配对

答案：D

解析：CRISPR-Cas12a（如Cpf1）的切割需gRNA与靶DNA的前间隔区（protospacer）精确配对，且识别PAM（TTTV）；切割后产生5’突出的粘性末端；通过设计多个gRNA可实现多靶标切割。

4.某样品经高效液相色谱（HPLC）分析，采用C18反相柱，流动相为乙腈-水（梯度洗脱），若目标峰保留时间过短，可调整的参数是：

A.降低流动相中乙腈的初始比例

B.提高柱温

C.减小流速

D.增大进样量

答案：A

解析：反相HPLC中，极性小的物质保留强（保留时间长）。乙腈比例降低（水比例升高），流动相极性增强，目标物与固定相（非极性C18）的作用增强，保留时间延长。提高柱温会降低保留（分子运动加快），减小流速可能延长保留但效果较弱，增大进样量不影响保留时间（除非超载）。

5.测定血清葡萄糖含量时，若采用己糖激酶法，其反应体系中需加入的辅酶是：

A.NAD+

B.NADP+

C.FAD

D.FMN

答案：B

解析：己糖激酶催化葡萄糖生成6-磷酸葡萄糖（G-6-P），随后葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH）催化G-6-P生成6-磷酸葡萄糖酸，同时将NADP+还原为NADPH，通过检测340nm吸光度变化定量葡萄糖。

6.关于原核生物转录终止的描述，正确的是：

A.ρ因子依赖型终止需发夹结构与polyU尾

B.非ρ因子依赖型终止的RNA产物3’端含polyA尾

C.ρ因子通过解螺旋酶活性终止转录

D.所有终止子均需ρ因子参与

答案：C

解析：ρ因子依赖型终止需ρ因子（解螺旋酶）结合RNA并沿其移动，追上RNA聚合酶后解链终止；非ρ因子依赖型（内在终止子）需RNA中发夹结构及下游连续U序列（非polyA）。

7.某蛋白质样品经SDS电泳后出现两条带（分子量分别为30kDa和60kDa），若该蛋白质为同源四聚体（由相同亚基组成），最可能的解释是：

A.部分亚基发生二聚化（两个30kDa亚基形成60kDa二聚体）

B.样品中混有另一种分子量为60kDa的杂质蛋白

C.该蛋白质亚基本身为60kDa，部分被蛋白酶切割为30kDa

D.SDS处理不充分，四聚体未完全解离

答案：A

解析：同源四聚体由4个相同亚基组成，若亚基分子量为30kDa，四聚体应为120kDa。SDS中若部分亚基通过二硫键形成二聚体（30×2=60kDa），则电泳可见30kDa（单体）和60kDa（二聚体）两条带。若为杂质或切割，无法解释同源四聚体的组成；SDS处理不充分会导致高分子量条带（如120kDa）。

8.在代谢组学研究中，采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）分析样品时，通常需要对样品进行衍生化处理，主要目的是：

A.提高目标物的挥发性和热稳定性

B.增强目标物的紫外吸收

C.增加目标物的分子量

D.降低目标物的极性

答案：A

解析：GC-MS要求分析物具有一定挥发性和