单核细胞增生李斯特菌三基因缺失减毒活疫苗候选株的构建与特性研究.docxVIP

单核细胞增生李斯特菌三基因缺失减毒活疫苗候选株的构建与特性研究

一、引言

1.1单核细胞增生李斯特菌概述

单核细胞增生李斯特菌（Listeriamonocytogenes），作为李斯特菌属的重要成员，是一种革兰氏阳性的兼性厌氧短杆菌，其菌体大小为（0.4-0.5）μm×（0.5-2）μm，直或稍弯，多数菌体一端较大，呈棒状，常呈V字形排列，有时也会出现丝状或双球状。在22℃-25℃的环境中，该菌可形成4根鞭毛，鞭毛的存在有助于其在环境中的运动和传播。不过，周生鞭毛易脱落，在营养丰富的环境下，菌体可能形成荚膜，这为其提供了一定的保护机制。

单核细胞增生李斯特菌对生存环境的适应能力极强，这也是其在自然界广泛分布的重要原因。它的营养要求并不苛刻，兼性厌氧的特性使其既能在有氧环境下生存，也能在无氧环境中生长，最适宜在含有二氧化碳的微需氧环境中繁衍。该菌的生长温度范围极广，从-1.5℃的低温到45℃的高温环境下都能生存，尤其能在普通冰箱冷藏室（通常为4℃左右）中生长繁殖，是典型的耐冷性细菌，这也让冰箱成为了它传播的潜在温床。此外，它还具有耐盐性，对碱和盐的抵抗力较强，在土壤、粪便、青贮饲料和干草等环境中都能长期存活。不过，它对酸较为敏感，耐碱不耐酸。在60-70℃的温度下，经过5-20分钟即可被杀死；70%酒精5分钟、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20分钟也可将其杀灭。同时，它对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺等多种抗生素均敏感。

在自然界中，单核细胞增生李斯特菌无处不在，土壤、污水、饲料、动物以及各种生食和即食食品，如肉类、蛋类、禽类、海产品、乳制品、蔬菜等，都可能成为它的藏身之所。它能够通过受污染的原料、加工环境或人员交叉污染进入食物链。在食品加工和储存过程中，如果卫生条件控制不当，就极易造成食品的污染。例如，在一些乳制品加工厂，若设备清洁不彻底，残留的李斯特菌就可能污染后续生产的产品；在家庭厨房中，生熟食物交叉放置，也可能导致李斯特菌从生食传播到熟食上。

单核细胞增生李斯特菌主要以食物为传染媒介，是一种极具威胁的食源性病原体。人类主要通过食用被污染的食品而感染，如软奶酪、未充分加热的鸡肉、未再次加热的热狗、鲜牛奶、巴氏消毒奶、冰激凌、生牛排、羊排、卷心菜色拉、芹菜、西红柿、法式馅饼、冻猪舌等。约85%-90%的感染病例是由被污染的食品引起的。它可以通过口腔-粪便的途径在动物间传播，健康人粪便中该菌的携带率为0.6-16%，有70%的人可短期带菌。此外，它还能通过眼及破损皮肤、黏膜进入体内造成感染，孕妇感染后，可通过胎盘或产道感染胎儿或新生儿，栖居于阴道、子宫颈的该菌也会引起感染，性接触也是本病传播的可能途径，且有上升趋势。

1.2李斯特菌病的现状与危害

李斯特菌病是由单核细胞增生李斯特菌感染所引发的疾病，对人类和动物的健康都构成了严重威胁。在全球范围内，李斯特菌病的发病情况不容乐观。据世界卫生组织（WHO）统计，全球每年大约有10万人因感染李斯特菌而发病，其中约3万人死亡。自2008年起，欧盟的李斯特菌病病例呈现持续上升的趋势，2014年确认病例达到2161例，与2013年相比，确诊病例大约增加了22.71%，死亡报告为210例。美国每年约有1600人感染李斯特菌，约260人死亡。2024-2025年，美国多次暴发李斯特菌感染事件，如2025年2月24日美国疾病控制和预防中心发布公报称，多个州暴发与能量补充饮品相关的李斯特菌感染，截至当时，全美已有21个州的38人感染，其中12人已死亡，此次感染事件最早的病例可追溯至2018年；2024年也有多州报告李斯特菌感染病例，造成2人死亡，20余人住院。在英国，2025年英国连锁超市梁木公司因产品中被检出李斯特菌而召回数款鸡肉产品；同年3月，英国还发生了一起与甜点有关的李斯特菌感染事件，导致3人死亡，2人病情严重。

李斯特菌病的感染症状多样，这与患者的年龄、免疫状态等因素密切相关。对于健康成人个体，感染后可能仅出现轻微类似流感的症状，如发热、肌肉疼痛、疲倦等，一般不会造成严重后果，甚至部分人携带病菌也不会发病。但对于易感人群，如新生儿、孕妇、65岁以上的老年人以及免疫功能低下者，感染李斯特菌后的后果则十分严重。新生儿感染李斯特菌后，可能引发败血症、脑膜炎等严重疾病，病死率高达30%-70%。孕妇感染李斯特菌的风险是普通人群的数倍，该菌可穿过胎盘屏障，在妊娠早期引发自然流产，在孕中期导致胎死宫内或胎盘炎症，在孕晚期可能引发早产或