红曲中桔青霉素的测定 液相色谱-串联质谱.docxVIP

ICS67.050

CCSC146

团体标准

T/NAIA0456—2025

红曲中桔青霉素的测定液相色谱-串联质谱法

DeterminationofCitrinininRedYeastby

LiquidChromatography-TandemMassSpectrometry

2025-12-30发布2026-01-10实施

宁夏化学分析测试协会发布

T/NAIA0456-2025

I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定起草。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本文件起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞及葡萄酒质量安全））、宁夏职业技术大学、宁夏化学分析测试协会。

本文件主要起草人：张瑶、龚慧、郭阳、王泽岚、刘继辉、高琳、周锦文、张赫宇、徐瑞、张小飞。

T/NAIA0456—2025

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红曲中桔青霉素的测定液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了红曲中桔青霉素的液相色谱-串联质谱检测方法。

本文件适用于红曲中桔青霉素的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682《分析实验室用水规格和实验方法》。

GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定》。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样经甲醇水溶液提取，免疫亲和柱净化，反相色谱柱分离，供液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，实验用水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂与材料

5.1.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。

5.1.2乙腈（C2H3N）：色谱纯。

5.1.3甲酸（HCOOH）。

5.1.470%甲醇水：取70mL甲醇，用水定容至100mL。

5.1.5PBS缓冲溶液：称取8.0g氯化钠、1.2g磷酸氢二钠、0.2g磷酸二氢钾、0.2g氯化钾，用水溶解，调节pH至7.0，水定容至1000mL。

5.1.60.1%磷酸溶液：准确移取1mL磷酸加水定容至1000mL。

5.1.7甲醇-0.1%磷酸溶液（70+30）：取0.1%磷酸溶液30mL，用甲醇定容至100mL。

5.1.80.1%甲酸水溶液：取1.0mL甲酸，用水稀释定容至1000mL，混匀。

5.1.90.1%甲酸乙腈溶液：取1.0mL甲酸，用乙腈稀释定容至1000mL，混匀。

5.1.10免疫亲和柱：3mL，柱容量20ng。

5.1.11有机微孔滤膜，孔径0.22μm，或相当着。

5.2标准物质

T/NAIA0456—2025

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桔青霉素标准物质（C13H14O5，CAS号：518-75-2），浓度为100μg/mL。

5.3标准溶液配制

5.3.1标准储备液（10.0μg/mL）：准确移取1.0mL桔青霉素标准物质，用甲醇（5.1.1）定容至10mL容量瓶中，于-18℃避光保存，保存期限为3个月。

5.3.2标准中间液（1.0μg/mL）：准确移取1.0mL桔青霉素标准储备液（5.3.1）于10mL容量瓶中，用甲醇定容，浓度为1.0μg/mL，于-18℃避光保存。

5.3.3基质标准工作液：分别移取标准中间液（5.3.2）0.01mL、0.02mL、0.05mL、0.1mL、0.2mL、0.5mL至10mL容量瓶中，用阴性样品提取液定容至刻度，得到质量浓度为1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL的标准工作液，临用现配。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源。

6.2分析天平：感量0.01g。

6.3涡旋混合器。

6.4高速离心机：最大转速9000r/min。

6.5氮吹仪（带水浴）。

7分析步骤

7.1样品制备

取50g红曲试样，经充分粉碎成细末，装入密闭洁净容器中标记明示，冷冻保存。

7.2样品的提取与净化

7.2.1样品提取

称取1.0g（精确至0.01g）红