第七章+原核基因表达调控.pptVIP

第七章原核基因表达调控;第一节原核基因表达调控总论;一、原核基因表达调控分类;二、原核基因表达调控主要特点;三、与基因表达调控相关的名词;3.顺式作用元件和反式作用因子

Cis-actingelement：是指具有调节功能的特定DNA序列或影响自身基因表达活性的DNA序列，在基因的同一条DNA分子上；如启动子。

Trans-actingfactor（转录因子TF）：由调节基因编码，调节基因是一种特殊的结构基因，其编码产物（RNA或蛋白质）可以扩散，控制其他基因的表达。;反式作用因子（转录因子）含有两种不同的结构域：

a、DNA结合结构域（domaim）

（1）、螺旋-反转-螺旋（Helix-turn-helix）

（2）、锌指（Znicfinger）

（3）、Basicdomains(Helix-loop-helix,

andleucinezipper).基域通常以二聚体形式结合于DNA上.;三种DNA结合结构域模式：;Zinc-finger蛋白结构特征;HLH结构特征;Leucine-zipper的结构特征;转录激活结构域主要有如下三个特征：

（1）、酸性激活域

（2）、谷酰胺丰富域

（3）、脯氨酸丰富域

阻遏域（repressordomain）

是专一性的直接阻遏的结构域，也是一种功能结构域。;4.操纵子（Operon）:是原核生物基因表达和调控的基本单元，一个典型的操纵子包括:

1.结构基因：是指参与特异性生物合成途径酶的基因，这些基因共同被调控。

2.控制元件：如操纵基因

3.调节基因：其产物识别控制元件;一、TheLacOperon（乳糖操纵子）;一、乳糖操纵子

(ThelactoseOperon，Lac);i;lac操纵子;Lacrepressor;RNA聚合酶和阻遏物能够同时结合到lac启动子和操纵基因（operator）上，lac阻遏物增加了RNA聚合酶对lac的结合能力，约为2倍以上。这样RNA聚合酶紧密结合Plac，但由于有阻遏物的结合并不引起转录的进行。;i;Allolactose(异乳糖)能引起阻遏物四聚体形成中发生变化，降低其对乳糖操纵基因的亲和性，从而使四聚体从lac操纵基因上被移除，并使聚合酶迅速开始lacZYA的转录.;Lactose/allolactose（乳糖/异乳糖）是Lac发生转录释放RNA的一个天然诱导剂。IPTG(isopropyl-?-D-thiogalacto-pyranoside异丙基硫代半乳糖苷),是一个合成的诱导剂,能迅速刺激lac操纵子结构基因的转录.?IPTG被用于许多含有lac启动子的载体中诱导克隆基因的表达,如pUC18.;Back;诱导:cAMPreceptorprotein(CRP)（cAMPacceptorproteinorcataboliteactivatorprotein,CAP）;当葡萄糖存在时;;Back;二、Trp操纵子;162;trp阻遏物（repressor);;Theattenuator弱化子(10xdown);前导RNA的结构;14个氨基酸（由前导RNA中第27-68bp的碱基编码）;弱化作用(Attenuation):

依赖于转录和翻译的高度配合;Hightrp;Lackoftrp;LowTrp;弱化作用的调节在氨基酸合成中是普遍的(6operons),例如His操纵子有一个前导序列，其编码含有7个连续的组氨酸的多肽.(His操纵子不含有阻遏物-操纵基因调节).;三、其他操纵子;RNA聚合酶识别两个起始位点S1和S2，cAMP-CRP复合物对S1和S2起始有不同作用，抑制从S2部位转录，促进从S1转录。

体内有葡萄糖时，不能形成cAMP-CRP复合物，则S2部位转录，产生本底水平表达合成半乳糖差向异构酶（galE的产物），促使尿苷二磷酸（UDP）-葡萄糖转变成UDP-半乳糖（大肠杆菌细胞壁合成前体），供细菌生理所需。

当体内有半乳糖（无葡萄糖）时，cAMP-CRP复合物抑制从S2部位转录，促进从S1转录。产生大量的相关酶，以利用半乳糖合成葡萄糖-1-磷酸供机体利用。

Gal操纵子的双启动子功能，既保证了细胞壁合成所需的本底表达，又可在半乳糖存在时，利用其做碳源，充分体现了其经济型。;2、阿拉伯糖（arabinose）操纵子;;ara-operon操纵子如何调节;3.阻遏蛋白LexA的降解与细菌中的SOS应