10.微生物遗传变异和育种.pptVIP

第八章微生物的遗传变异与育种;遗传与变异的概念;变异(variation):生物体在外因或内因的作用下，遗传物质的结构或数量发生改变。

饰变（modification）：指不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。

特点是：;细菌的变异现象;形态结构变异;青霉素、溶菌酶

正常形态细菌L型变异

抗体或补体(部分或完全失去胞壁)

;特殊结构的变异

?42-43℃

炭疽杆菌失去形成芽孢能力,毒性降低

10-20天????????

变形杆菌0.1%石炭酸

迁徙生长（H）点状生长、单个菌落（O）;毒力变异;;凡游离于原核生物核基因组之外，具有独立复制能力的小型共价闭合环状的双链DNA分子．分子量约为２—100×106D.携带1—100个基因,一个菌细胞可有一至数十个质粒。;2质粒的特点：;

存在范围：很多细菌如E.coli、Shigella、S.aureus、Streptococcuslactis、根癌土壤杆菌等

制备：包括增殖、裂解细胞、分离质粒与染色体和蛋白质等成分、去除RNA和蛋白质等步骤。

鉴定：电镜观察、电泳、密度梯度离心、限制性酶切图谱等方法;3质粒的种类：;4.1F–因子（fertilityfactor）：又称致育因子或性因子，62×106Dalton，94.5kb，相当于核染色体DNA2%的环状双链DNA，足以编码94个中等大小多肽，含有与质粒复制和转移有关的许多基因和一些转座因子（可以整合到宿主核染色体上的一定部位）。

决定性别（F+－雄性；F-－雌性）。;tra基因编码性纤毛蛋白；

IS2和IS3为插入序列；

Tn1000为转座子。;;R因子由相连的两个DNA片段组成，即抗性转移因子（resistencetransforfactor，RTF）和抗性决定R因子（r-determinant）。

RTF为分子量约为11×106Dalton，控制质粒拷贝数及复制和转移。

抗性决定因子大小不固定，从几百万到100×106Dalton以上。其上带有各种抗生素的抗性基因。;;产大肠杆菌素因子。

大肠杆菌素是由E.coli的某些菌株所分泌的细菌素，能通过抑制复制、转录、转译或能量代谢等而专一地杀死其它肠道细菌。其分子量约4×104~8×104Dalton。大肠杆菌素都是由Col因子编码的。

凡带Col因子的菌株，由于质粒本身编码一种免疫蛋白，从而对大肠杆菌素有免疫作用，不受其伤害。;即诱癌质粒。

存在于根癌土壤杆菌（Agrobacteriumtumefaciens）中,可引起许多双子叶植物的根癌。

当细菌侵入植物细胞中后，在其细胞中溶解，把细菌的DNA释放到植物细胞中。这时，含有复制基因的Ti质粒的T-DNA小片段与植物细胞中的核染色体发生整合，合成正常植株所没有的冠瘿碱类，破坏控制细胞分裂的激素调节系统，从而使它转变成癌细胞。

;农杆菌;Ti质粒长200kb，是一个大型质粒。当前，Ti质粒已成为植物遗传工程研究中的重要载体。一些具有重要性状的外源基因可借DNA重组技术设法插入到Ti质粒中，并进一步使之整合到植物染色体上，以改变该植物的遗传性，达到培育植物优良品种的目的。

;降解质粒：具有分解多种特殊有机化合物能力的因子。如分解甲苯的TOL质粒。

毒性质粒：携带编码产生毒素基因的质粒，如苏云金杆菌中编码内毒素的质粒，Col质粒也是毒性质粒。;第二节基因突变和诱变育种;依表型的改变分为：

营养缺陷型——因突变而丧失产生某种生物合成酶的能力，并因而成为必须在培养基中添加某种物质才能生长的突变类型。

抗性突变型——因突变而产生了对某种化学药物或致死物理因子的抗性。

条件致死突变型——突变后在某种条件下可正常生长繁殖，而在另一条件下却无法生长繁殖的突变型。

形态突变型——由突变引起的个体或菌落形态的变异。

抗原突变型——因突变而引起的抗原结构发生改变

产量突变型——通过基因突变而产生的在代谢产物产量上明显有别于原始菌株的突变株。;★按是否比较容易、迅速地分离到发生突变的细胞来分：

选择性突变株（selectivemutant）：具有选择标记（如营养缺陷型、抗性突变型、条件致死突变型），只要选择适当的环境条件，如培养基、温度、pH值等，就比较容易检出和分离到。

非选择性突变株（non-se