棉铃虫与烟青虫关键基因的表达特征及功能解析：信息素结合蛋白与醛糖还原酶的视角.docxVIP

棉铃虫与烟青虫关键基因的表达特征及功能解析：信息素结合蛋白与醛糖还原酶的视角

一、引言

1.1研究背景与意义

棉铃虫（Helicoverpaarmigera）和烟青虫（Helicoverpaassulta）均属鳞翅目夜蛾科昆虫，是农作物的重大害虫，每年给农业生产带来巨大的经济损失。棉铃虫寄主范围广泛，至少涵盖60种作物，包括棉花、玉米、小麦、大豆、烟草、番茄等，还涉及67种野生植物，分属于30余科，是典型的多食性害虫。烟青虫虽为寡食性害虫，但在农作物中主要危害烟草和辣椒，严重影响这些经济作物的产量与质量。

棉铃虫对棉花的危害极为严重，其幼虫以棉花的叶、花、蕾、铃为食，导致棉花减产和品质下降。在棉花生长的关键时期，棉铃虫的侵害可能使棉花的蕾铃脱落率大幅增加，造成棉花产量损失可达10%-20%，严重时甚至更高。棉铃虫还会对玉米、大豆等作物造成损害，影响粮食的产量和质量安全。烟青虫对烟草和辣椒的危害同样不容忽视。在烟草种植中，烟青虫幼虫蛀食烟草的叶片、花蕾和果实，导致烟草叶片出现孔洞、缺刻，影响烟草的光合作用和生长发育，降低烟草的品质和产量。在辣椒种植中，烟青虫以幼虫蛀食花蕾、果实为主，也会食害茎、叶和芽，果实被蛀后易引起腐烂而大量落果，严重时蛀果率达30%以上，对辣椒的产量和品质造成极大影响。

传统的化学防治方法虽然在一定程度上能够控制棉铃虫和烟青虫的危害，但长期大量使用化学农药不仅导致害虫抗药性增强，使防治效果逐渐降低，还对环境造成严重污染，破坏生态平衡，对非靶标生物产生负面影响，同时也增加了农产品中的农药残留，威胁人类健康。因此，寻找更加绿色、可持续的害虫防治策略迫在眉睫。

从分子生物学角度深入研究棉铃虫和烟青虫的信息素结合蛋白和醛糖还原酶基因表达与功能，对于揭示这两种害虫的嗅觉识别机制、生长发育调控机制以及对环境适应性机制具有重要意义，进而为开发新型绿色防治技术提供理论基础。信息素结合蛋白在昆虫的嗅觉通讯中起着关键作用，参与性信息素的识别、运输和传递过程，影响昆虫的求偶、交配等行为。通过研究信息素结合蛋白的基因表达和功能，可以深入了解昆虫的嗅觉识别机制，为研发基于干扰昆虫嗅觉通讯的绿色防控技术提供靶点，如开发特异性的信息素类似物或拮抗剂，干扰害虫的交配行为，减少害虫的繁殖数量。醛糖还原酶参与昆虫体内的多种生理过程，如能量代谢、解毒作用等，对昆虫的生长发育和生存适应具有重要影响。研究醛糖还原酶的基因表达和功能，有助于揭示昆虫的生长发育调控机制和对环境压力的适应机制，为开发以醛糖还原酶为靶标的新型杀虫剂提供理论依据，通过抑制醛糖还原酶的活性，干扰昆虫的正常生理代谢，达到控制害虫的目的。

1.2国内外研究现状

在棉铃虫和烟青虫信息素结合蛋白研究方面，国内外学者已取得一定进展。研究表明，信息素结合蛋白在昆虫嗅觉识别中发挥关键作用，参与性信息素的运输和感知。对棉铃虫信息素结合蛋白的研究发现，其与性信息素分子存在特异性结合，且结合能力受pH等因素影响。中国农业大学生物学院陈忠周教授团队解析了棉铃虫HarmPBP1在不同pH值下及其与配体Z9-16：Ald形成复合物的结构，发现Z9-16：Ald主要通过疏水相互作用与蛋白发生结合，酸性pH值会导致蛋白结构细微变化，进而影响其配体结合能力。在烟青虫信息素结合蛋白研究中，也发现其具有类似的结构和功能特点，不同信息素结合蛋白在烟青虫不同发育阶段和组织中的表达存在差异，可能与烟青虫的嗅觉特异性和生理功能有关。

对于醛糖还原酶基因表达和功能的研究，在其他生物中已有较多报道，但在棉铃虫和烟青虫中的研究相对较少。醛糖还原酶是醛-酮还原酶超家族的一员，以烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（NADPH）为辅酶催化多种醛、酮类物质还原为醇。在人类医学研究中，醛糖还原酶与糖尿病并发症、氧化应激性疾病等密切相关。在昆虫中，醛糖还原酶可能参与昆虫的解毒代谢、生长发育等过程。有研究推测棉铃虫和烟青虫中的醛糖还原酶可能在应对植物次生代谢产物的解毒过程中发挥作用，但具体的基因表达模式和功能机制尚待深入研究。

1.3研究目标与内容

本研究旨在深入探究棉铃虫和烟青虫信息素结合蛋白和醛糖还原酶的基因表达模式与功能特性，为开发针对这两种害虫的新型绿色防治策略提供理论依据。具体研究内容如下：

采用实时荧光定量PCR、原位杂交等技术，分析棉铃虫和烟青虫在不同发育阶段（卵、幼虫、蛹、成虫）以及不同组织（触角、头部、胸部、腹部、翅等）中信息素结合蛋白基因和醛糖还原酶基因的表达水平，明确其时空表达特征。

运用基因克隆技术获取棉铃虫和烟青虫信息素结合蛋白基因和醛糖还原酶基因的全长序列，并进行生物信息学分析，预测其蛋白结构、功能域和进化关系。

通过原核表达、真核表达等方法制备重组信息素结合蛋