鳗弧菌及脂多糖刺激下大菱鲆肝脾凝集素和Toll样受体基因的时序表达分析.pdfVIP

第56卷第4期海洋与湖沼Vol.56,No.4

2025年7月OCEANOLOGIAETLIMNOLOGIASINICAJul.2025

鳗弧菌及脂多糖刺激下大菱鲆肝脾凝集素和

Toll样受体基因的时序表达分析*

1,2,31,3①1,3①1,31,31,3

苟冬惠孙志宾马爱军田蜜王新安黄智慧

孙伟恒1,3朱春月1,3刘志峰1,3

(1.海水养殖生物育种与可持续产出全国重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所中国-东盟海水养殖技术

“一带一路”联合实验室(青岛)山东青岛266071;2.上海海洋大学水产与生命学院上海201306;

3.青岛海洋科技中心海洋生物学与生物技术功能实验室山东青岛266237)

摘要凝集素和Toll样受体对激活先天免疫系统以应对入侵的病原体至关重要,为探究革兰氏阴性

菌鳗弧菌、灭活鳗弧菌以及LPS刺激大菱鲆PAMP识别受体基因的免疫应答机制,以平均体质量为

(19.37±4.31)g、平均体长为(10.71±0.69)cm的大菱鲆为实验对象,分别于免疫后0、12、24、48、72

和96h采集肝和脾组织,提取总RNA,采用qPCR检测肝脏和脾脏中LEC、SAP、TLR5M、TLR14基

因的表达水平。结果显示:在肝脏中,活菌刺激下LEC、SAP、TLR5M和TLR14基因与对照组相比均

呈上调表达,上调表达高峰均在0~24h,基因表达量最高值是对照组的14~3857倍;灭活菌和LPS刺

激下LEC、TLR5M和TLR14基因与对照组相比均呈上调表达,表达高峰分别在24~72h和48~72h,

最高表达量分别是对照组的52~447倍和18~184倍。在脾脏中,活菌刺激下LEC和TLR14基因与对

照组相比均呈上调表达,上调表达高峰均在0~24h,基因表达量最高值是对照组的5~223倍;灭活菌

和LPS刺激下LEC、SAP和TLR14基因与对照组相比均呈上调表达,LEC和SAP表达高峰在0~12h,

TLR14表达高峰在48~72h,最高表达量分别是对照组的4~28倍和2~68倍,其他基因表现为显著下

调或无明显变化。研究结果表明:不同免疫刺激能引起肝脏和脾脏PAMP识别受体基因的快速变化,

并且这些基因的表达变化具有组织特异性。免疫后肝脏和脾脏在0~72h中,可用更为简单的免疫增

强剂LPS或灭活菌代替活菌注射,通过LEC、SAP、TLR5M和TLR14PAMP识别受体基因表达作为

评价指标。研究结果可为抗鳗弧菌新品种选育和海水鱼类免疫增强剂筛选提供理论依据。

关键词病原相关分子模式;模式识别受体;凝集素;Toll样受体;革兰氏阴性菌;鳗弧菌

中图分类号Q954;S965;Q789doi:10.11693/hyhz20250300063

鱼类作为现存最古老的脊椎动物类群,其进化地统抵御外界病原体入侵的过程中,模式识别受体

位和生理特征呈现多样性,其中有颌鱼类虽已进化出(pattern-recognitionreceptors,PRRs)对病原微生物的

T细胞和B细胞介导的适应性免疫系统,但其免疫系识别是先天免疫应答启动的重要步骤(Janewayetal,

统不