- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
组织捣碎机的使用方法及注意事项
组织捣碎机作为实验室中用于破碎动植物组织、细胞或微生物的重要设备,在生物化学、分子生物学、食品科学等领域发挥着关键作用。其通过高速旋转的刀片或研磨珠对样品进行物理破碎,释放出细胞内的生物大分子(如DNA、RNA、蛋白质)或活性物质,为后续的提取、纯化和分析实验提供基础。正确掌握其使用方法和注意事项,不仅能确保实验结果的准确性和重复性,还能有效延长设备的使用寿命,保障操作人员的安全。
一、组织捣碎机的基本结构与工作原理
在开始操作前,了解组织捣碎机的基本构造和工作原理,有助于更好地理解其操作要点和维护需求。
(一)基本结构
典型的组织捣碎机主要由以下几个部分组成:
主机(MotorBase):内置高速电机,提供动力。主机上通常设有电源开关、速度调节旋钮或按钮、定时器(部分型号)等控制元件。
驱动轴(DriveShaft):连接主机电机和工作头,传递旋转动力。
工作头(WorkingHead):这是直接与样品接触并进行破碎的部分,根据破碎原理和样品类型的不同,工作头有多种设计:
刀片式(BladeType):最常见的类型,通常由不锈钢制成,有不同形状的刀片(如十字刀、锯齿刀),通过高速旋转切割、剪切组织。
研磨珠式(BeadMillType):工作头内装有研磨珠(如玻璃珠、陶瓷珠),通过高速振荡或旋转带动研磨珠撞击、研磨样品。
探头式(ProbeType):也称为匀浆机探头,通常为一根细长的金属杆,末端带有特殊设计的结构,插入样品中进行高速旋转剪切。
容器(Container):用于盛放待处理的样品和缓冲液。常见的有玻璃烧杯、不锈钢杯或特制的可密封离心管(对于小型或需要控温的样品)。容器的选择需考虑样品量、化学兼容性和是否需要无菌操作。
固定装置(Clamp/Stand):用于将容器固定在主机下方,确保在高速运转时容器保持稳定,防止样品飞溅或容器倾倒。
(二)工作原理
组织捣碎机的核心工作原理是通过机械能对样品施加强烈的物理作用力,从而破坏细胞或组织的结构。主要的破碎机制包括:
剪切力(ShearingForce):高速旋转的刀片或探头与样品之间、样品颗粒之间以及样品与容器壁之间产生的摩擦力和相对运动,导致细胞或组织被撕裂。
冲击力(ImpactForce):高速运动的刀片直接撞击组织块,或研磨珠在高速运动下撞击样品颗粒。
空化效应(Cavitation):在刀片高速旋转的区域,液体局部压力降低,形成微小气泡,随后气泡迅速破裂产生冲击波,对周围的细胞结构造成破坏。这种效应在液体样品中尤为明显。
研磨作用(Grinding):研磨珠之间以及研磨珠与样品之间的摩擦和碾压。
不同类型的工作头和操作条件(如转速、时间、温度)会侧重不同的破碎机制,或多种机制协同作用。
二、组织捣碎机的使用方法
正确的操作流程是获得理想破碎效果和保证设备安全的前提。以下是通用的操作步骤指南,具体操作需参照所使用设备的说明书。
(一)操作前准备
安全检查:
检查电源线是否完好,插头是否牢固。
确保主机放置在平稳、干燥的台面上,远离水源和易燃物。
确认工作头、容器等部件清洁、干燥且无损坏。对于刀片式工作头,检查刀片是否锋利,有无缺口或变形。
样品准备:
选择合适的样品量:根据容器大小和工作头的有效工作容积,确定合适的样品量。样品量过多可能导致破碎不充分或液体溢出;样品量过少则可能导致刀片空转,磨损刀片或产生过多热量。
预处理样品:对于较大的组织块,建议先进行初步切割,切成小块(如1-5mm3),以便于后续破碎。
选择合适的缓冲液或介质:根据实验目的选择合适的缓冲液(如PBS、Tris-HCl等)或提取液。缓冲液的pH值、离子强度和是否含有保护剂(如蛋白酶抑制剂、RNase抑制剂)对保护目标分子的活性至关重要。将样品与适量的缓冲液混合,通常样品与缓冲液的比例为1:3至1:10,具体比例视组织类型和破碎难度而定。
温度控制:许多生物活性物质(如酶、RNA)对温度敏感,高速破碎过程会产生热量。如果实验对温度敏感,应考虑在冰浴条件下进行操作,或选择带有冷却夹套的容器。
设备组装:
根据样品类型和破碎需求,选择合适的工作头和容器。
将工作头正确安装到驱动轴上,确保连接牢固,无松动。对于刀片式工作头,注意刀片的安装方向。
将装有样品和缓冲液的容器放置在工作头下方,调整容器位置,使工作头的刀片或探头浸没在样品液面以下适当深度(通常建议刀片至少浸没1-2cm,避免空转吸入空气产生过多泡沫)。
使用固定装置将容器牢固地固定在主机上,防止在高速运转时发生位移。
(二)操作步骤
启动与试运行:
接通电源,打开主机电源开关。
选择合适的转速。通常建议从较低转速开始,逐渐增加至所需转速,以观察样品的破碎情况并避免瞬间产生过大的冲击力导致样
原创力文档


文档评论(0)