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全国高考生物实验操作重点汇编与练习题

前言

生物学科是一门以实验为基础的自然科学，实验操作能力的考查是高考生物试题的重要组成部分。掌握实验原理、规范实验操作、准确观察记录并分析实验结果，是提升生物学科素养和应试能力的关键。本文旨在梳理全国高考生物实验操作的核心要点，并辅以针对性练习，帮助同学们系统复习，夯实基础，从容应对高考挑战。

一、重点实验操作汇编

（一）显微镜的使用与细胞观察

显微镜是生物实验中最基本也是最重要的仪器，其规范使用直接影响观察效果。

1.取镜与安放：一手握镜臂，一手托镜座，将显微镜平稳放置在实验台偏左位置，镜筒朝前。

2.对光：转动转换器，使低倍物镜对准通光孔（注意不要用手扳物镜）。调节遮光器（选用较大光圈）和反光镜，左眼注视目镜内，直至视野呈现明亮均匀的圆形光斑。对光成功的标志是视野明亮且无杂斑。

3.低倍镜观察：将制作好的装片放在载物台上，用压片夹固定，使观察对象正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直至物镜接近玻片标本（此时眼睛应从侧面注视物镜与玻片的距离，防止压碎玻片或损坏物镜镜头）。然后左眼注视目镜，反向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直至看清物像。若物像不清晰，可略微转动细准焦螺旋进行调焦。

4.高倍镜观察：在低倍镜下找到清晰的物像，并将其移至视野中央（“偏哪移哪”）。转动转换器，换用高倍物镜。调节细准焦螺旋，使物像清晰（注意：高倍镜下严禁使用粗准焦螺旋）。若视野较暗，可调节遮光器或反光镜增加亮度。

5.注意事项：

*镜头的清洁：只能用专用的擦镜纸擦拭目镜和物镜镜头。

*放大倍数：物镜倍数×目镜倍数，放大的是物像的长度或宽度，而非面积或体积。

*成像特点：倒立、放大的虚像。

（二）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

此类实验的关键在于理解显色反应的原理、试剂的正确使用及实验材料的选择。

1.还原糖的鉴定（斐林试剂）：

*原理：还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂在水浴加热条件下反应生成砖红色沉淀。

*材料选择：富含还原糖且颜色较浅或近于白色的组织，如苹果、梨匀浆。

*试剂：甲液（质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液）、乙液（质量浓度为0.05g/mL的CuSO?溶液），使用时需等量混合均匀后再注入（即现配现用）。

*步骤：取组织样液→加入斐林试剂→水浴加热（约50-65℃）→观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色沉淀）。

2.脂肪的鉴定（苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液）：

*原理：脂肪可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。

*材料选择：富含脂肪的组织，如花生种子。

*步骤：（切片法）取材→切片→制片→染色（苏丹Ⅲ染液，需用体积分数为50%的酒精洗去浮色）→镜检（先用低倍镜找到目标，再换高倍镜观察橘黄色脂肪颗粒）。

3.蛋白质的鉴定（双缩脲试剂）：

*原理：蛋白质中的肽键在碱性环境下与Cu2?反应生成紫色络合物。

*材料选择：富含蛋白质的组织，如豆浆、蛋清稀释液。

*试剂：A液（质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液）、B液（质量浓度为0.01g/mL的CuSO?溶液）。

*步骤：取组织样液→加入A液（创造碱性环境）→摇匀→加入B液（4滴，不能过量，否则Cu(OH)?蓝色会掩盖紫色）→摇匀→观察颜色变化（出现紫色）。

（三）观察植物细胞的质壁分离和复原

该实验是理解植物细胞渗透作用的经典实验，操作的规范性直接影响实验现象的清晰度。

1.原理：成熟的植物细胞（具有大液泡和细胞壁）在外界溶液浓度大于细胞液浓度时，细胞失水，原生质层收缩，与细胞壁分离（质壁分离）；当外界溶液浓度小于细胞液浓度时，细胞吸水，原生质层恢复原状（质壁分离复原）。

2.材料选择：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（液泡呈紫色，便于观察）。

3.步骤：

*制作洋葱鳞片叶外表皮临时装片（注意撕取的是外表皮，且要薄而完整）。

*低倍镜观察（观察正常细胞的形态，可见原生质层紧贴细胞壁）。

*引流法滴加质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液（从盖玻片一侧滴入，另一侧用吸水纸吸引，重复几次，确保细胞浸润在蔗糖溶液中）。

*低倍镜观察（观察质壁分离现象：液泡变小，颜色变深，原生质层与细胞壁逐渐分离）。

*引流法滴加清水（方法同上）。

*低倍镜观察（观察质壁分离复原现象：液泡变大，颜色变浅，原生质层逐渐贴近细胞壁）。

4.注意事项：

*蔗糖溶液浓度要适宜（0.3g/mL），浓度过高会导致细胞过度失水死亡，无法复原；浓度过低则质壁分离不明显。

*观察时应选取有中央大液泡的成熟细胞。

*引流操作要规范，避免产生气泡。

（四）观察细胞的有丝分裂

此实验的关键在于根尖