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林木基因编辑原生质体验证试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.分离原生质体常用的酶不包括（）

A.纤维素酶B.淀粉酶C.果胶酶

答案：B

2.原生质体培养常用的渗透压调节剂是（）

A.蔗糖B.葡萄糖C.甘露醇

答案：C

3.基因编辑常用的技术是（）

A.PCRB.CRISPR/Cas9C.ELISA

答案：B

4.原生质体活力检测常用的方法是（）

A.酚藏花红染色B.革兰氏染色C.番红染色

答案：A

5.以下哪种不是林木原生质体的来源（）

A.叶片B.种子C.愈伤组织

答案：B

6.用于原生质体分离的材料需进行（）处理

A.灭菌B.干燥C.冷冻

答案：A

7.原生质体融合的方法不包括（）

A.化学融合B.电融合C.热融合

答案：C

8.基因编辑中向导RNA的作用是（）

A.切割DNAB.引导Cas9蛋白到目标位点C.连接片段

答案：B

9.原生质体培养时，培养基的pH一般调至（）

A.5.0-5.5B.5.6-5.8C.6.0-6.5

答案：B

10.筛选基因编辑成功的原生质体常用（）

A.抗生素筛选B.温度筛选C.密度筛选

答案：A

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.影响原生质体分离的因素有（）

A.酶的种类和浓度B.材料的生理状态C.分离时间D.渗透压

答案：ABCD

2.基因编辑技术的应用领域包括（）

A.作物育种B.基因功能研究C.疾病治疗D.生态修复

答案：ABCD

3.原生质体活力检测方法有（）

A.荧光素双醋酸酯（FDA）染色B.伊文思蓝染色C.酚藏花红染色D.中性红染色

答案：ABC

4.用于林木原生质体分离的材料可以是（）

A.悬浮细胞B.茎尖C.根尖D.花粉

答案：ABCD

5.基因编辑中Cas9蛋白的特点有（）

A.识别特定的DNA序列B.具有核酸酶活性C.可与向导RNA结合D.能自我复制

答案：ABC

6.原生质体培养过程中可能遇到的问题有（）

A.污染B.褐化C.再生困难D.融合率低

答案：ABCD

7.以下属于基因编辑工具的是（）

A.ZFNB.TALENC.CRISPR/Cas9D.FISH

答案：ABC

8.原生质体融合的目的包括（）

A.创造新的基因型B.克服远缘杂交不亲和C.获得杂种优势D.提高基因表达水平

答案：ABC

9.筛选基因编辑细胞系的方法有（）

A.抗生素筛选B.荧光标记筛选C.表型筛选D.测序筛选

答案：ABCD

10.影响基因编辑效率的因素有（）

A.向导RNA设计B.Cas9蛋白浓度C.细胞类型D.培养条件

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.所有林木的原生质体都能容易地分离和培养。（）

答案：×

2.基因编辑只能对植物的基因进行敲除。（）

答案：×

3.原生质体没有细胞壁，所以对渗透压不敏感。（）

答案：×

4.酶解分离原生质体时，酶浓度越高越好。（）

答案：×

5.CRISPR/Cas9系统只能在植物中应用。（）

答案：×

6.原生质体活力越高，培养的成功率越高。（）

答案：√

7.基因编辑后的原生质体一定能再生为完整植株。（）

答案：×

8.电融合是原生质体融合最常用的方法。（）

答案：×

9.筛选基因编辑成功的细胞不需要进行验证。（）

答案：×

10.不同林木品种的原生质体培养条件相同。（）

答案：×

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述原生质体分离的基本步骤。

答案：选取合适材料，表面灭菌；将材料切成小块，放入含酶液（纤维素酶、果胶酶等）的溶液中，一定温度、转速下酶解；酶解完成后过滤、离心收集原生质体；用渗透压调节剂洗涤，再离心，得到纯化原生质体。

2.说明基因编辑中CRISPR/Cas9技术的原理。

答案：CRISPR序列转录出向导RNA，它与Cas9蛋白结合形成复合物。向导RNA识别并结合目标DNA序列，Cas9蛋白发挥核酸酶活性，对目标DNA进行切割，实现基因编辑。

3.原生质体培养时需要注意哪些条件？

答案：注意培养基成分，包括营养物质、渗透压调节剂等；控制培养温度，一般接近植物