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集成多通道SPR生物传感芯片生物敏感膜研究

一、引言

表面等离子共振（SurfacePlasmonResonance，SPR）技术自问世以来，凭借其独特的无标记、高灵敏度以及实时检测生物分子相互作用的优势，在生物医学、食品安全、环境监测等众多领域展现出巨大的应用潜力。传统的单通道SPR传感器在实际应用中逐渐暴露出实验周期长、仪器体积大、检测通量低等局限性，难以满足现代快速、高通量检测的需求。集成多通道SPR生物传感芯片应运而生，通过多组二元光学器件为多个通道提供不同角度的入射光，并利用电控平移台在二维方向上扫描获取各通道共振角度信息，显著提高了检测通量，缩短了实验周期，同时实现了系统的集成化与小型化。

生物敏感膜作为SPR生物传感芯片的核心部件，直接决定了传感器对目标生物分子的特异性识别与响应能力。其性能优劣关乎整个传感系统能否准确、高效地检测到生物分子的存在及其浓度变化。因此，深入研究生物敏感膜的固定方法、性能优化以及有效性验证等方面，对于提升集成多通道SPR生物传感芯片的综合性能具有至关重要的意义。

二、SPR技术基础

2.1SPR原理

当入射光以特定角度照射到金属（如金、银）与介质的界面时，在金属表面会产生表面等离子体波（SurfacePlasmonWave，SPW）。此时，入射光的能量与表面等离子体波发生共振耦合，导致反射光强度急剧下降，在特定角度处出现共振吸收峰，该角度即为共振角度。生物分子在金属膜表面的吸附或结合会引起表面折射率的变化，进而改变共振角度。通过精确测量共振角度的改变，即可实现对生物分子相互作用的实时监测与定量分析。例如，当目标生物分子与固定在金属膜表面的探针分子发生特异性结合时，界面处的质量增加，折射率相应改变，SPR信号随之变化，这种变化与生物分子的浓度、亲和力等参数密切相关。

2.2SPR生物传感系统构成

2.2.1光学器件

光学器件在SPR生物传感系统中承担着关键作用，负责产生、引导和检测与表面等离子体波相互作用的光信号。通常包括光源、光路传输组件（如光纤、棱镜等）以及光探测器。光源提供具有特定波长和功率的入射光，常见的有激光二极管、发光二极管等。棱镜耦合结构利用高折射率棱镜实现入射光与表面等离子体波的耦合，是经典的SPR激发方式；在集成多通道系统中，二元光学器件则为多个通道提供不同角度的入射光，确保各通道能够独立激发SPW并产生可检测的SPR信号。光探测器用于捕获反射光强度变化，将光信号转换为电信号，以便后续的数据采集与分析，如光电二极管阵列可实现对多个通道反射光的并行检测。

2.2.2电路系统

电路系统主要负责为整个SPR生物传感系统提供稳定的电源供应，同时对光探测器输出的电信号进行放大、滤波、模数转换等处理。放大电路增强微弱电信号的幅值，使其能够被后续电路有效处理；滤波电路去除信号中的噪声干扰，提高信号的质量；模数转换电路将连续的模拟电信号转换为数字信号，便于计算机进行数据存储、分析与处理。此外，电路系统还可能包含对系统中其他组件（如电控平移台、微流控系统驱动部件等）的控制电路，实现对整个系统的协同控制，确保各部分精确运行。

2.2.3桌面软件

桌面软件是用户与SPR生物传感系统交互的重要界面，具备数据采集、处理、分析以及系统控制等多种功能。在数据采集方面，软件能够实时获取模数转换后的数字信号，并按照设定的时间间隔进行存储，形成完整的实验数据记录。数据处理功能则对采集到的数据进行基线校正、噪声消除、信号归一化等预处理操作，以提高数据的准确性和可比性。通过内置的数据分析算法，软件可以从处理后的数据中提取关键信息，如共振角度的变化量、生物分子结合与解离的动力学参数（结合速率常数、解离速率常数、平衡解离常数等），并以直观的图表形式展示实验结果，帮助用户快速理解和分析实验数据。同时，用户还可以通过软件界面设置系统的各项参数，如光路调节、扫描范围、微流控流速等，实现对整个SPR生物传感实验过程的灵活控制。

三、生物敏感膜固定方法

3.1金膜制备

金膜作为SPR生物传感芯片的基础支撑与信号响应层，其质量和性能对生物敏感膜的固定以及整个传感系统的检测效果具有重要影响。常用的金膜制备方法包括物理气相沉积（PhysicalVaporDeposition，PVD）技术，如电子束蒸发、磁控溅射等。以磁控溅射为例，在高真空环境下，氩离子在电场作用下加速轰击金靶材，使金原子从靶材表面溅射出来，并沉积在基底（如玻璃片）上逐渐形成均匀的金膜。通过精确控制溅射时间、功率、气压等参数，可以精准调控金膜的厚度，一般SPR传感芯片所用金膜厚度在40-60nm之间，该厚度范围既能保证良好的SPR信号响应，又能确保金膜具有一定的稳定